[發(fā)明專利]用于檢測(cè)豬星狀病毒的多重RT-PCR引物組、試劑盒及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110550666.4
• 申請(qǐng)日: 2021-05-17
• 公開（公告）號(hào): CN113046489B
• 公開（公告）日: 2022-12-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃偉堅(jiān);劉歡;劉心;張文超;陳櫻;韋祖樟;歐陽(yáng)康
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 廣西南寧公平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 45104
• 代理人: 藍(lán)文苑

1.用于檢測(cè)豬星狀病毒的多重RT-PCR引物組，其特征在于，包括五對(duì)特異性引物，分別是引物PAstV1-F和PAstV1-R、引物PAstV2-F和PAstV2-R、引物PAstV3-F和PAstV3-R、引物PAstV4-F和PAstV4-R、引物PAstV5-F和PAstV5-R，它們的核甘酸序列分別為如序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.10所示的堿基序列。

2.用于檢測(cè)豬星狀病毒的多重RT-PCR試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的多重RT-PCR引物組。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于檢測(cè)豬星狀病毒的多重RT-PCR試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括5×buffer、dNTPMix、M-MLV Reverse Transcriptae、RNA酶抑制劑、RNA、Taraka Ex×Taq、10×ExTaq Buffer、dNTP Mix、Template cDNA和ddH₂O。

4.權(quán)利要求1所述的多重RT-PCR引物組在非診斷為目的的RT-PCR擴(kuò)增豬星狀病毒中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述RT-PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系為多重RT-PCR引物組各0.8μmol/L、Taraka Ex×Taq 0.25μL、10×Ex Taq Buffer 5μL、dNTP Mix 4μL、cDNA模板各1μL、滅菌后ddH₂O補(bǔ)齊至50μL。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述RT-PCR擴(kuò)增反應(yīng)條件為98^oC變性10s，55^oC退火30s，72^oC延伸1min，30個(gè)循環(huán)。