[發明專利]一種特異性檢測體系的食品中四環素檢測方法

有效

• 申請號: 202110545912.7
• 申請日: 2021-05-19
• 公開（公告）號: CN113310956B
• 公開（公告）日: 2022-10-28
• 發明（設計）人: 陳全勝;張運蓮;榮雅文;劉蕊;歐陽琴;李歡歡
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于核殼型上轉換和磁性納米材料的特異性檢測體系的食品中四環素檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一，通過高溫熱分解法合成稀土摻雜的上轉換內核納米材料；

將稀土氯化物溶解后，在隔絕氧氣條件下與油酸和1-十八稀加熱澄清透明后冷卻，加入NaOH和NH₄F后繼續高溫加熱反應，冷卻后離心得到沉淀，洗滌沉淀并進行真空冷凍干燥，得到稀土元素摻雜的上轉換內核納米材料；

步驟二，通過高溫熱分解法合成稀土摻雜的上轉換核殼納米材料；

將上轉換外殼所需稀土氯化物溶解后，在隔絕氧氣條件下與油酸和1-十八稀加熱澄清透明后冷卻，加入步驟二中的上轉換內核納米材料，再加入NaOH和NH₄F后繼續高溫加熱反應，冷卻后離心得到沉淀，洗滌沉淀并進行真空冷凍干燥，得到稀土元素摻雜的上轉換核殼納米材料；

步驟三，四環素識別探針的制備；

將步驟二中的上轉換核殼納米材料加入到酸性溶液中，經超聲處理后去除表面油酸基團，使Eu³⁺暴露出來，用去離子水洗滌后離心，得到四環素識別探針；

步驟四，采用水熱法合成表面具有羧基官能團的四氧化三鐵磁性納米材料；

將FeCl3、無水醋酸鈉加入到乙二醇中溶解，再加入檸檬酸三鈉攪拌得到混合溶液，將溶液轉移到反應釜中，高溫下反應；反應結束后取出反應釜冷卻至室溫，利用外界磁場分離，棄上清液，得到棕色材料，洗滌后置于烘箱干燥，得到羧基化四氧化三鐵磁性納米材料粉末；

步驟五，特異性檢測體系的建立；

將步驟三得到的四環素識別探針與不同濃度的四環素標準溶液孵育后，再加入步驟四中的四氧化三鐵磁性納米材料，得到不同濃度的四環素檢測液，經過孵育后，經外界磁場分離后測定上清液中的熒光強度信號特征值F，以四環素濃度對數值C和熒光強度信號特征值F進行線性擬合，建立四環素含量檢測的標準曲線；

步驟六，樣本中四環素含量的檢測；

將食品樣本經預處理，提取得到含有食品中四環素的溶液，將所得溶液按照與步驟五過程相同操作加入到特異性檢測體系中，經外界磁場分離后，將測定的熒光強度信號特征值，帶入步驟五所得的標準曲線，計算出食品中四環素的含量；

步驟一中，所述稀土元素摻雜的上轉換內核納米材料為摻雜鑭系Er金屬元素的上轉換熒光納米材料；

步驟二中，所述稀土元素摻雜的上轉換核殼納米材料為摻雜鑭系Er金屬元素和鑭系Eu金屬元素的上轉換核殼納米材料。

2.根據權利要求1所述的一種基于核殼型上轉換和磁性納米材料的特異性檢測體系的食品中四環素檢測方法，其特征在于，步驟三中，所述酸性溶液為鹽酸、硫酸等強酸性溶液，濃度為0.01M-0.1M，超聲處理的時間為15-25min。

3.根據權利要求1所述的一種基于核殼型上轉換和磁性納米材料的特異性檢測體系的食品中四環素檢測方法，其特征在于，步驟三中，去離子水在14000-16000rpm的轉速下離心洗滌3-5次。

4.根據權利要求1所述的一種基于核殼型上轉換和磁性納米材料的特異性檢測體系的食品中四環素檢測方法，其特征在于，步驟四中，所述四氧化三鐵磁性納米材料具有羧基基團，可在20s內經外界磁場快速分離。

5.根據權利要求1所述的一種基于核殼型上轉換和磁性納米材料的特異性檢測體系的食品中四環素檢測方法，其特征在于，步驟五中，所述不同濃度的四環素檢測液的濃度范圍為0.2-20000ng/mL，所述的四環素標準溶液和特異性檢測體系的體積比為1：10。

6.根據權利要求1所述的一種基于核殼型上轉換和磁性納米材料的特異性檢測體系的食品中四環素檢測方法，其特征在于，步驟五中，四環素識別探針溶液中，上轉換核殼納米材料的濃度為1-3mg/mL，加入的四氧化三鐵磁性納米材料的濃度為1-3mg/mL，四環素識別探針溶液和磁性納米溶液的體積比為4：5，檢測體系與磁性納米材料的孵育時間為5-15min。