[發(fā)明專(zhuān)利]一種美國(guó)白蛾不同種群密度的熒光定量?jī)?nèi)參基因及其引物和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110544686.0
• 申請(qǐng)日: 2021-05-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113151505B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-12-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙旭東;陳瑾;郝德君;耿薏舒;喬恒;王璟廷
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6888
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6888;C12Q1/6851;C12N15/11;C12N15/12
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11385
• 代理人: 戴嵩瑋

1.用于擴(kuò)增美國(guó)白蛾不同種群密度的熒光定量?jī)?nèi)參基因的引物或熒光定量檢測(cè)試劑盒在熒光定量檢測(cè)不同種群密度下的美國(guó)白蛾功能基因中的應(yīng)用；

所述引物包括擴(kuò)增RPS26基因用引物和/或擴(kuò)增RPS15基因用引物；

所述擴(kuò)增RPS26基因用引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的反向引物；

所述擴(kuò)增RPS15基因用引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示的反向引物；

所述熒光定量檢測(cè)試劑盒包括所述引物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述美國(guó)白蛾的種群密度包括1～15頭/100ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述功能基因的熒光定量檢測(cè)的反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性30s；95℃5s，60℃34s，40個(gè)循環(huán)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述功能基因的熒光定量檢測(cè)的反應(yīng)體系為20.0μL，包括SYBR Premix Ex-Taq 10.0μL，10mM正向引物1.0μL，10mM反向引物1.0μL，100ng/μL cDNA 2.0μL，無(wú)RNA酶的ddH₂O 6.0μL。

5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任意一項(xiàng)所述應(yīng)用，其特征在于，所述功能基因包括絲氨酸蛋白酶基因HcSP2。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述應(yīng)用，其特征在于，所述絲氨酸蛋白酶基因HcSP2的擴(kuò)增用引物為核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示的反向引物。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述應(yīng)用，其特征在于，所述熒光定量檢測(cè)試劑盒還包括SYBRPremix Ex Taq。