[發(fā)明專利]一種利用HPLC指紋圖譜鑒別決明子提取物的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110544555.2
• 申請(qǐng)日: 2021-05-19
• 公開（公告）號(hào): CN113281432A
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張繼斌;王玉;劉晶晶;陳志元
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 勁牌持正堂藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/36
• 代理公司: 北京文苑專利代理有限公司 11516
• 代理人: 胡頡

1.一種利用HPLC指紋圖譜鑒別決明子提取物的方法，其特征在于：包括以下測(cè)定條件及步驟：

參照物溶液的制備：精密稱取橙黃決明素對(duì)照品，使用甲醇溶解制成參照物溶液；

決明子提取物溶液的制備：精密稱取多個(gè)不同批次決明子提取物，使用75％濃度乙醇溶解制成決明子提取物溶液；

色譜分析條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1％乙酸為流動(dòng)相按規(guī)定進(jìn)行梯度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)為284nm；

指紋圖譜的建立：精密吸取參照物溶液10μL注入液相色譜儀，測(cè)定，記錄60分鐘的色譜圖，即得參照物色譜圖；精密吸取多個(gè)不同批次決明子提取物溶液各10μL，分別注入液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定，記錄60分鐘的色譜圖，得到多個(gè)決明子提取物色譜圖；各決明子提取物色譜圖中應(yīng)呈現(xiàn)10個(gè)與參照物色譜圖相對(duì)應(yīng)的色譜峰，其中9號(hào)峰(橙黃決明素)與參照物峰保留時(shí)間相對(duì)應(yīng)，得出決明子提取物液相色譜的共有模式，作為決明子提取物標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；

指紋圖譜的應(yīng)用：將待測(cè)試的決明子提取物色譜圖與決明子提取物標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜進(jìn)行比對(duì)，計(jì)算兩者的相似度，根據(jù)相似度數(shù)值即可確定決明子提取物質(zhì)量。

2.據(jù)權(quán)利要求1所述一種利用HPLC指紋圖譜鑒別決明子提取物的方法，其特征在于：所述參照物溶液的制備步驟中，參照物溶液濃度為30μg/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種利用HPLC指紋圖譜鑒別決明子提取物的方法，其特征在于：所述決明子提取物溶液的制備步驟中，決明子提取物溶液濃度為3mg/ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述一種利用HPLC指紋圖譜鑒別決明子提取物的方法，其特征在于：所述決明子提取物溶液的配制步驟為：精密稱取決明子提取物決明子提取物30mg于10mL容量瓶中，加入75％乙醇約8mL，超聲(250W，53KHz)溶解10分鐘后，放置冷卻至室溫，用75％乙醇溶解定容至刻度，搖勻，過濾，即得濃度為3mg/ml的決明子提取物溶液。

5.種利用HPLC指紋圖譜鑒別決明子提取物的方法的制備方法，其特征在于：所述色譜分析條件中，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1％乙酸為流動(dòng)相，洗脫梯度如下：

時(shí)間/min	乙腈	0.1％乙酸
0	15	85
3	20	80
35	30	70
50	65	35
50.1	15	85
60	15	85