[發(fā)明專利]一種NSC668394在制備提高豬精子授精能力的試劑中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110543785.7
• 申請日: 2021-05-19
• 公開（公告）號: CN113373110B
• 公開（公告）日: 2023-05-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳珍芳;洪林君;徐志謙;謝言射;吳昌華;蔡更元;李紫聰;顧婷;楊杰;楊化強(qiáng);鄭恩琴;徐錚;黃思秀
• 申請（專利權(quán)）人: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N5/076
• 分類號: C12N5/076
• 代理公司: 佛山市君創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44675
• 代理人: 許菲菲

1.一種NSC668394在制備體外提高豬精子授精能力的試劑中的應(yīng)用，其特征在于：

所述的提高豬精子授精能力的試劑為含BSA和苯甲酸鈉咖啡因的豬精子獲能液和NSC668394的混合物；其中，所述的NSC668394的終濃度為30μM；

所述的含BSA和苯甲酸鈉咖啡因的豬精子獲能液包含如下組分：KCl?0.224g/L，CaCl₂·2H₂O?1.102g/L，NaCl?6.611g/L，Tris?2.324g/L，D-葡萄糖?1.982g/L，丙酮酸鈉0.550g/L，BSA?2g/L，苯甲酸鈉咖啡因0.68g/L。

2.一種體外提高豬精子授精能力的試劑，其特征在于為含BSA和苯甲酸鈉咖啡因的豬精子獲能液和NSC668394的混合物；

所述的NSC668394的終濃度為30μM；

所述的含BSA和苯甲酸鈉咖啡因的豬精子獲能液包含如下組分：KCl?0.224g/L，CaCl₂·2H₂O?1.102g/L，NaCl?6.611g/L，Tris?2.324g/L，D-葡萄糖?1.982g/L，丙酮酸鈉0.550g/L，BSA?2g/L，苯甲酸鈉咖啡因0.68g/L。

3.一種體外提高豬精子授精能力的方法，其特征在于包含如下步驟：

（1）收集豬精液，離心，棄上清，得到精子沉淀；

（2）將步驟（1）制得的精子沉淀用洗精液重懸并洗滌，然后再將精子沉淀置于含BSA和苯甲酸鈉咖啡因的豬精子獲能液中洗滌；

（3）經(jīng)過步驟（2）洗滌后將精子沉淀再次重懸于含BSA和苯甲酸鈉咖啡因的豬精子獲能液中，并在該體系中加入終濃度為30μM的NSC668394處理精子，所述的處理時(shí)間為3h。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的體外提高豬精子授精能力的方法，其特征在于：

步驟（1）中所述的豬精液為采精量大于100ml、精子密度大于2×10⁸/mL、精子活力在65%以上和形態(tài)正常大于80%的豬精液樣品。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的體外提高豬精子授精能力的方法，其特征在于：

步驟（2）中所述的洗精液為含1g/L?BSA的PBS。