[發明專利]一種具有穩定促生作用的內生真菌AT177及其應用

有效

• 申請號: 202110540487.2
• 申請日: 2021-05-18
• 公開（公告）號: CN113249230B
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發明（設計）人: 張鵬;高麗偉;申國明;于祥全;王鵬;丁志勇;王耀斌;張富軍
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院煙草研究所(中國煙草總公司青州煙草研究所)
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/30;A01P21/00;A01G22/45;A01G7/06;C12R1/645
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 孫光遠

本發明公開了一種具有穩定促生作用的內生真菌AT177(Leptosphaerulina chartarum AT177)及其應用。屬于微生物技術領域。本發明以促進煙草生長、提高煙葉品質為目標，對分離獲得的煙草內生真菌進行了篩選，獲得具有明顯促生效果的功能菌株，可應用于制備煙草專用微生物菌肥。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，更具體的說是涉及一種具有穩定促生作用的內生真菌AT177及其應用。

背景技術

煙草(學名：Nicotiana tabacum L.)是茄科煙草屬植物，一年生或有限多年生草本，全體被腺毛；根粗壯。莖高0.7～2米，基部稍木質化。葉矩圓狀披針形、披針形、矩圓形或卵形，頂端漸尖，基部漸狹至莖成耳狀而半抱莖?；ㄐ蝽斏瑘A錐狀，多花；花梗長5～20毫米。蒴果卵狀或矩圓狀，長約等于宿存萼。種子圓形或寬矩圓形，徑約0.5毫米，褐色。夏秋季開花結果。原產于南美洲。中國南北各省區廣為栽培。

內生真菌是生長在健康植物組織內的一類微生物種群，在植物生長發育及在植物抗生物和非生物脅迫中發揮著重要作用。研究表明內生真菌能促進植物生長、誘導植物產生抗病性、提高植物對重金屬的耐性等。煙草是重要的葉用經濟作物，在國民經濟中占據重要的地位。煙草產量和品質的提高，是煙草產業健康發展的基礎。通過發掘利用煙草內生真菌資源，對促進煙草生長、提高煙草抗病蟲害、抗重金屬和抗干旱脅迫具有積極意義。

因此，從煙草內生真菌中篩選獲得具有顯著促生效果的菌株，如何通過煙草-內生真菌共培養體系實現穩定促生效果，使煙苗的個體間差異較小是本領域技術人員亟需解決的問題。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種具有穩定促生作用的內生真菌AT177及其應用。

其中，內生真菌(Leptosphaerulina chartarum AT177)AT177保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號。保藏編號：CGMCCNo.21951；保藏日期2021年4月12日。

本發明以促進煙草生長、提高煙葉品質為目標，對分離獲得的煙草內生真菌進行了篩選，獲得具有明顯促生效果的功能菌株，可應用于制備煙草專用微生物菌肥

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種煙草促生的菌肥，包括內生真菌AT177(Leptosphaerulina chartarumAT177)，保藏編號為CGMCC No.21951。

本發明還提供了一種煙草促生的方法，使用內生真菌AT177作為菌肥施用，保藏編號為CGMCC No.21951。

本發明還提供了一種內生真菌AT177在促進煙草生產中的應用，使用包括內生真菌AT177的菌肥，保藏編號為CGMCC No.21951。

優選的：包括以下步驟：

1)育苗：取煙草種子置于無菌水浸泡后揉搓；育苗土于育苗盤中吸滿水備用，將揉搓后的種子，均勻的灑在育苗盤中，溫室中培養，長至4片葉時用于移栽；

2)菌肥的制備：大麥粒在水中浸泡過夜后，密封高溫濕熱滅菌，冷卻備用，得麥粒固體培養基；菌株活化后，接種于麥粒固體培養基中，恒溫黑暗培養，待菌絲布滿麥粒；

3)菌肥的施用：采用“土壤層+菌肥層+土壤層”的方法施用菌肥，水分吸透后，育苗至5片葉時，移栽至花盆中，溫室中培養。

優選的：步驟1)和步驟3)溫室的環境：25℃16h光照，光照強度80μmm^-2sec^-1，再置于22℃8h黑暗培養，交替循環；培養時間45～60d。

優選的：步驟2)高溫濕熱滅菌：121℃滅菌20min，滅菌三次。