[發(fā)明專利]一種大花美人蕉去病毒優(yōu)質(zhì)種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110540175.1 | 申請(qǐng)日： | 2021-05-18 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN113100069B | 公開（公告）日： | 2022-10-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 曾宋君;吳坤林;李琳;房林 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 中國科學(xué)院華南植物園 |
| 主分類號(hào)： | A01H4/00 | 分類號(hào)： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001 | 代理人： | 劉明星;朱聰聰 |
| 地址： | 510650 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 美人蕉 病毒 優(yōu)質(zhì) 種苗 組織培養(yǎng) 快速 繁殖 方法 | ||
1.一種大花美人蕉去病毒優(yōu)質(zhì)種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步驟：
a.外植體的獲得和消毒方法：
選擇生長(zhǎng)健壯的、表面無病毒感染癥狀的大花美人蕉優(yōu)良母株，挖取根莖上2－4厘米長(zhǎng)的嫩芽，擦拭干凈后，經(jīng)第一次消毒后，剝除嫩芽外面的嫩葉，再經(jīng)第二次消毒，剝?nèi)?-4毫米的莖尖，接種于初代培養(yǎng)基中，所述的初代培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基+3.0-5.0毫克/升6-芐基嘌呤+8-12毫克/升抗病毒醚+蔗糖20-30克/升+瓊脂，pH 5.8-6.0，先在黑暗條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度35-37℃，然后將無污染并成活的莖尖在培養(yǎng)溫度26-30℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時(shí)/天下培養(yǎng)直至外植體基部有不定芽長(zhǎng)出；
b.不定芽誘導(dǎo)和繼代增殖：將3-4厘米高的不定芽切去上部葉片接種到不定芽誘導(dǎo)和繼代增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)和增殖，所述的不定芽誘導(dǎo)和繼代增殖培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基+3.0-5.0毫克/升6-芐基嘌呤+3.0-5.0毫克/升激動(dòng)素+0.1-0.5毫克/升萘乙酸+8-12毫克/升抗病毒醚+蔗糖20-30克/升+瓊脂，pH 5.8-6.0，先在35-37℃條件下暗培養(yǎng)，再移入光照下培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度26-30℃，光照度1500-2000lx，光照12-16小時(shí)/天，然后將增殖芽接種到增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖，所述的增殖培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基+3.0-5.0毫克/升6-芐基嘌呤+3.0-5.0毫克/升激動(dòng)素+0.1-0.5毫克/升萘乙酸+蔗糖20-30克/升+瓊脂，pH5.8-6.0；
c、生根培養(yǎng)：當(dāng)芽高3-4厘米時(shí)，切下接種到生根培養(yǎng)基中進(jìn)行生根培養(yǎng)，所述的生根培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基+1.0-2.0毫克/升吲哚丁酸+1.0-2.0克/升活性炭+蔗糖15-20克/升+瓊脂，pH 5.8-6.0，培養(yǎng)溫度26-30℃，光照度1800-2500lx，光照12-16小時(shí)/天；
d、試管苗移栽：當(dāng)生根試管苗長(zhǎng)至5-6厘米高時(shí)，在自然光照下煉苗，然后打開瓶塞，把試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗掉根部培養(yǎng)基，栽入基質(zhì)中，澆水、遮蔭、保溫和保濕；
e、病毒檢測(cè)：取即將出瓶的試管苗進(jìn)行病毒檢測(cè)，獲得無病毒感染的試管苗；
所述的不定芽誘導(dǎo)和繼代增殖中在35-37℃條件下暗培養(yǎng)，是在黑暗條件下培養(yǎng)5天，且培養(yǎng)溫度35-37℃。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大花美人蕉去病毒優(yōu)質(zhì)種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述的第一次消毒是用體積分?jǐn)?shù)75％乙醇棉擦拭表面，浸泡在體積分?jǐn)?shù)75％酒精中浸泡10-30秒后，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)1％次氯酸鈉溶液消毒5-7分鐘，無菌水沖洗4-6次。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大花美人蕉去病毒優(yōu)質(zhì)種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述的第二次消毒是將剝除外面的嫩葉的嫩芽放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1％升汞溶液消毒1-3分鐘，無菌水沖洗4～6次。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大花美人蕉去病毒優(yōu)質(zhì)種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述的試管苗移栽中的基質(zhì)是由泥炭土:珍珠巖＝2-4:1v/v混合而成的基質(zhì)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的大花美人蕉去病毒優(yōu)質(zhì)種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述的病毒檢測(cè)是取即將出瓶的試管苗葉片用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行病毒檢測(cè)。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的大花美人蕉去病毒優(yōu)質(zhì)種苗組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述的病毒檢測(cè)是對(duì)黃瓜花葉病毒、菜豆黃花葉病毒、黃斑駁病毒和煙草花葉病毒進(jìn)行檢測(cè)。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于中國科學(xué)院華南植物園，未經(jīng)中國科學(xué)院華南植物園許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
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