[發明專利]蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑及其應用

有效

• 申請號: 202110531251.2
• 申請日: 2021-05-17
• 公開（公告）號: CN113289020B
• 公開（公告）日: 2023-04-18
• 發明（設計）人: 黃明東;袁彩;梁程輝;李金宇;劉見永;王帥;江龍光;徐芃
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K31/165;A61K31/352;A61K31/609;A61K31/12;A61P7/02
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

本發明公開了8種蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑及其在抗血栓形成中的應用。提供了8種分屬多種結構類型的蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑及其用途。熒光結合實驗及胰島素還原實驗表明8種蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑均能結合在PDI?b’x結構域而抑制蛋白質二硫鍵異構酶的活性。取三種黃酮類小分子抑制劑做體內實驗，在電刺激誘導的小鼠血栓形成模型中，小分子抑制劑能有效延后小鼠血栓形成時間，表現出好的抗凝效果。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑及其應用。

背景技術

蛋白質二硫鍵異構酶（protein?disulfide?isomerase,?PDI）是內質網中一類重要的氧化還原酶，主要包含a-b-b’-a’4個類硫氧還蛋白結構域，晶體結構表明PDI的四個結構域呈U型結構排列。其中a與a’結構域是其催化結構域，位于U型的開口處，“CGHC”基序構成其活性中心，負責二硫鍵的形成，斷裂和重排；b與b’?結構域不具有催化能力，位于U型結構的底部區域，主要負責底物的結合。PDI可以通過自身活性中心氧化還原狀態的變化將二硫鍵引入新生蛋白質；也可以作為分子伴侶幫助蛋白質正確折疊，在維持內質網的穩態中起著重要的作用。PDI在一些情況下還可以分泌到細胞外，調節細胞表面受體的構象二硫鍵而調節受體蛋白活性，進而調節一系列生理過程。

在血栓形成過程中，PDI會從活化的血小板中分泌出來，調節多種血小板表面整合素受體（如αIIbβ3，GPIbα等）及凝血因子（如血小板因子V，組織因子等）的活性而調節血栓的形成，在血栓形成的過程中起著極其重要的作用。在小鼠實驗模型中，PDI抗體的加入明顯抑制了小鼠血栓的形成，表明PDI可以作為一個抗血栓形成的藥物開發靶點。近年來，高通量篩選及虛擬篩選的應用促進了小分子抑制劑的發展，以PDI為靶點的抗血栓形成抑制劑開發也成為當下的一個熱點。本發明通過體外實驗篩選出的8?種PDI小分子抑制劑，它們都是通過直接結合PDI的b’x結構域而抑制PDI的活性。這些抑制劑在電刺激誘導的小鼠血栓形成模型中有效的延長了小鼠血栓形成時間，表現出良好的抗凝效果。

發明內容

本發明的目的在于提供了8種靶向蛋白質二硫鍵異構酶（PDI）的小分子抑制劑及其應用，這8種小分子抑制劑的結構與目前現有的PDI小分子抑制劑結構不同。體外實驗表明，這些小分子抑制劑均可不同程度的抑制PDI活性。

一種蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑，所述蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑為化合物2-氨基-3-羥基-N’-（2,3,4-三羥基芐基）丙酰肼鹽酸鹽、3-羥基-2-苯基-4H-色烯-4-酮、乙酸4-甲酰基-2-甲氧基苯酯、2-羥基-N-苯基苯甲酰胺、3,5,7-三羥基-2-苯基-4H-色烯-4-酮、1-（2,4-二羥基苯基）-3-（4-羥基苯基）丙-2-烯-1-酮、4'-O-(3,4-二甲基三甘醇基芐基)、4'-O-(4-硝基芐基)槲皮素中的一種。上述述8種蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑化合物的結構如下：

上述蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑能直接結合PDI-b’x結構域，抑制蛋白質二硫鍵異構酶的活性。

上述蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑在抗血栓形成中的應用。

上述蛋白質二硫鍵異構酶小分子抑制劑在制備抗血栓形成的藥物中的應用。

本發明的有益效果在于：本發明提供了8種小分子抑制劑作為蛋白質二硫鍵異構酶抑制劑的應用。在分子水平上，這幾種小分子抑制劑可以與蛋白質二硫鍵異構酶的b’x結構域直接相互作用而抑制PDI的活性。Galangin,?4’-O-(3,4-triethyleneglycol)-quercetin及4’-O-(4-nitrobenzyl)-quercetin三種黃酮類小分子在電刺激誘導的小鼠血栓形成模型中，明顯延后小鼠血栓形成時間，表現出良好的抗血栓形成效果。

附圖說明