[發(fā)明專(zhuān)利]一種將脂肪組織制備成納米囊泡的方法及該納米囊泡的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110529291.3
• 申請(qǐng)日: 2021-05-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113304111B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾宇陽(yáng);孫家明;汪振星;陳靂風(fēng);孫諦;牟珊
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院
• 主分類(lèi)號(hào): A61K9/127
• 分類(lèi)號(hào): A61K9/127;A61K47/46;A61L27/36;A61L27/50;B82Y5/00;B82Y40/00;A61L27/60
• 代理公司: 武漢楚天專(zhuān)利事務(wù)所 42113
• 代理人: 楊宣仙

1.一種將脂肪組織制備成納米囊泡的方法，其特征在于，具體步驟如下：

（1）通過(guò)臨床手術(shù)獲取新鮮脂肪組織標(biāo)本，并用生理鹽水漂洗；

（2）將脂肪組織剪碎成小塊，裝入5～50毫升的螺口注射器中，注射器通過(guò)螺紋連接器與另一螺口注射器相連；

（3）在兩分鐘內(nèi)快速來(lái)回推擠注射器中的脂肪組織，將脂肪推擠成均一黃色的懸混液態(tài)，轉(zhuǎn)入無(wú)菌離心管內(nèi)；

（4）使用離心機(jī)以2000g±200g的離心力對(duì)步驟（3）中的黃色液態(tài)懸混物離心5～10分鐘，使其離心分層為上部的油脂層和下部的淡黃色顆粒物；

（5）去掉離心分層后上部的油脂層，留取底層淡黃色顆粒狀物，并加入1～3毫升生理鹽水并吹打均勻；

（6）使用無(wú)菌超聲波發(fā)生探頭，以40～80瓦功率對(duì)淡黃色顆粒狀物進(jìn)行超聲3～5分鐘，獲得乳白色產(chǎn)物；

（7）再次使用離心機(jī)以2000g±200g離心力離心乳白色產(chǎn)物5-10分鐘，使其離心分層為上部的白色油脂層和下部的水質(zhì)層，并去除白色油脂層；

（8）使用多重過(guò)濾膜推擠裝置的注射器吸取上述離心后下層的水質(zhì)層，首先使用10微米孔徑的過(guò)濾膜，來(lái)回推擠注射器10次，后將過(guò)濾膜更換為孔徑5微米的過(guò)濾膜，繼續(xù)來(lái)回推擠注射器10次，后將過(guò)濾膜更換為孔徑1微米的過(guò)濾膜來(lái)回推擠注射器10次后，靜置2小時(shí)以上后得到直徑為60～400nm納米囊泡產(chǎn)物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將脂肪組織制備成納米囊泡的方法，其特征在于：所述步驟（1）中獲取的臨床手術(shù)獲取脂肪組織標(biāo)本不超過(guò)六小時(shí)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將脂肪組織制備成納米囊泡的方法，其特征在于：所述步驟（6）中超聲過(guò)程中，每超聲2秒后暫停2秒。

4.一種按照權(quán)利要求1中的方法制備的納米囊泡的應(yīng)用，其特征在于：將上述方法制備的納米囊泡與微顆粒真皮組織按照體積比2：3的比例混合均勻后制備用于軟組織缺損填充的組織填充物；所述微顆粒真皮組織是通過(guò)手術(shù)剪將手術(shù)中獲取的真皮組織剪成粒徑范圍在100um～500um的微顆粒形態(tài)。