[發(fā)明專利]一種檢測血栓或凝血相關(guān)疾病的生物標(biāo)志物及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110526415.2
• 申請日: 2021-05-14
• 公開（公告）號: CN113341154A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林哲
• 申請（專利權(quán)）人: 醫(yī)工瑞思（福建）工程研究中心有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京易捷勝知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11613
• 代理人: 黃駿鵬

本發(fā)明涉及血栓或凝血相關(guān)疾病檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種生物標(biāo)志物及其在血栓或凝血相關(guān)疾病檢測工作方面的應(yīng)用。標(biāo)志物包括凝血因子13激活肽(FXIIIAP)或/和凝血因子13的A亞基(FXIIIA)。本發(fā)明提供的檢測試劑盒包括捕獲抗體和檢測抗體，為以FXIIIAP為抗原制得的特異性抗體。本發(fā)明的生物標(biāo)志物在對包含腦卒中在內(nèi)的血栓或凝血相關(guān)疾病進(jìn)行快速篩查診斷方面有很好的應(yīng)用前景，可大大提高現(xiàn)有診斷的靈敏度和特異性，推測血栓形成時(shí)間及程度，并可對疾病的嚴(yán)重程度及預(yù)后進(jìn)行預(yù)測。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及血栓或凝血相關(guān)疾病檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種檢測血栓或凝血相關(guān)疾病的生物標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

血栓形成及其相關(guān)凝血性疾病一直是臨床診斷中重要診斷項(xiàng)目，涉及廣泛的疾病，包括腦靜脈血栓(CVT)，腎靜脈血栓(RVT)，靜脈血栓(VTE)，心肌梗塞(MI)等等。其中腦靜脈血栓、心肌梗塞的早期診斷與早期治療尤為重要。以腦靜脈血栓(缺血性中風(fēng)的一個(gè)重要原因)為例，現(xiàn)有的診斷方法主要包括計(jì)算機(jī)斷層掃描(CT)和磁共振成像(MRI)，在判斷中風(fēng)的發(fā)生、類型和嚴(yán)重性方面非常有效。然而，這些技術(shù)首先較為昂貴并且耗時(shí)，其次對早期發(fā)現(xiàn)的篩查作用不明顯，容易錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)。此外對于出血性腦卒中的診斷，CAT掃描(計(jì)算機(jī)化軸位斷層掃描)有較好的效果。盡管CAT掃描對出血性中風(fēng)的鑒別相對靈敏，但它在中風(fēng)評估中對腦缺血不十分靈敏，通常在中風(fēng)發(fā)作后24到36小時(shí)的時(shí)候才呈陽性，并且大約50％的缺血性腦卒中難以在CAT掃描看到。其結(jié)果往往是，當(dāng)現(xiàn)有的診斷技術(shù)確診中風(fēng)時(shí)，早期治療的機(jī)會已經(jīng)喪失。

對于急性缺血性及出血性腦卒中的診斷，目前這些臨床常用的方法在靈敏度，準(zhǔn)確度和時(shí)效性上存在不足，容易產(chǎn)生誤診或漏診，從而延誤治療時(shí)機(jī)。

近年來研究人員發(fā)現(xiàn)，利用分子標(biāo)志物快速篩選診斷并區(qū)分腦卒中的類型，是可供解決這些問題的新思路。

生物標(biāo)志物(biomarker)是指可以標(biāo)記生物體器官，組織或細(xì)胞結(jié)構(gòu)或功能改變的生化指標(biāo)，因此生物標(biāo)志物的檢測可用于疾病診斷、并為后續(xù)治療方案提供科學(xué)依據(jù)。

中風(fēng)的多種標(biāo)志物是已知的。在公開號為CN103299191A的發(fā)明專利中公開了中風(fēng)相關(guān)的分子標(biāo)志物。在公開號為CN1339108A的發(fā)明專利中公開了診斷和區(qū)分中風(fēng)的方法。

血栓形成可以作為診斷例如缺血性腦卒中等心血管疾病的一個(gè)重要指標(biāo)。目前臨床使用的對血栓的生物標(biāo)志物篩選檢查是D二聚體檢測，主要應(yīng)用在靜脈血栓栓塞(VTE)、深靜脈血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE)的診斷。在很多情況下，D二聚體的檢查已顯示出良好的發(fā)展前景。但由于多種因素都可以影響D二聚體的檢測，以及D二聚體本身的缺陷，因此在臨床上使用D二聚體檢測仍存在很多爭議。首先D二聚體來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊，主要反映纖維蛋白溶解(血栓溶解)的狀況，而并非直接反映血栓形成。所有影響血栓溶解的因素均可影響D二聚體檢測結(jié)果。例如具有溶栓障礙的患者，口服抗凝藥的患者，VTE癥狀持續(xù)14天以上的患者均可能為假陰性。另外，D二聚體反映血栓溶解過程且其半衰期較長(13-23小時(shí))當(dāng)患者有其他可引起凝血的誘因時(shí)，例如炎癥或懷孕時(shí)，也可以預(yù)期出現(xiàn)假陽性結(jié)果。同時(shí)D二聚體在臨床測試中也有很高的漏診率。例如，對于CVT，D二聚體存在20％的漏診，早期(癥狀出現(xiàn)小于24小時(shí))漏診率更高(大約50％)。對于靜脈血栓一般的D二聚體診斷也存在50％的漏診。特別是對早期新生成的血栓D二聚體容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

由于D二聚體半衰期長，不能在已有凝血疾病時(shí)，準(zhǔn)確及時(shí)反映機(jī)體是否正在發(fā)生出血及凝血。另外，由于D二聚體分析物的定義不明確，不同的測定方法基于識別不同纖維蛋白片段或表面結(jié)構(gòu)的不同單克隆抗體。沒有可以用作國際標(biāo)準(zhǔn)的參考制劑或校準(zhǔn)劑。加上其敏感度和特異性不高的缺點(diǎn)，D二聚體的應(yīng)用仍存在爭議。此外檢測結(jié)果缺乏治療指導(dǎo)意義，并不能及時(shí)準(zhǔn)確的反映體內(nèi)凝血狀況，無法指示治療策略，例如抗凝的效果如何，也難以確認(rèn)是否出現(xiàn)新血栓，因?yàn)殛惻f血栓依舊可以被溶解而產(chǎn)生D二聚體。

發(fā)明內(nèi)容

(一)要解決的技術(shù)問題