[發(fā)明專利]一種高產(chǎn)酸型槐糖脂的補(bǔ)料發(fā)酵方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110516282.0 | 申請日： | 2021-05-12 |
| 公開（公告）號： | CN113151020B | 公開（公告）日： | 2023-10-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 錢秀娟;李順;董維亮;劉仕勛;周杰;姜岷 | 申請（專利權(quán)）人： | 南京工業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N1/16 | 分類號： | C12N1/16;C12P19/12;C12R1/72 |
| 代理公司： | 江蘇致邦律師事務(wù)所 32230 | 代理人： | 徐蓓;尹妍 |
| 地址： | 211816 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 高產(chǎn) 酸型槐 糖脂 發(fā)酵 方法 | ||
1.一種高產(chǎn)酸型槐糖脂的補(bǔ)料發(fā)酵方法，步驟如下：
（1）取槐糖脂生產(chǎn)菌株接種于培養(yǎng)基上，進(jìn)行二次活化培養(yǎng)；
（2）取活化的單菌落接種至種子培養(yǎng)基培養(yǎng)得到種子液；
（3）將種子液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵培養(yǎng)基以酵母提取物為氮源，葡萄糖、菜籽油為碳源，無機(jī)鹽組分為KH2PO4、Na2HPO4，CaCl2和MgSO4，葡萄糖、菜籽油初始濃度為30~90g/L；
在發(fā)酵罐中加入發(fā)酵培養(yǎng)基，進(jìn)行發(fā)酵反應(yīng)；
發(fā)酵反應(yīng)時(shí)控制溶氧20%以上，葡萄糖自然消耗或補(bǔ)加葡萄糖維持濃度在30g/L以上；監(jiān)控菜籽油濃度，在菜籽油濃度≤30g/L時(shí)補(bǔ)加60g菜籽油；
（4）發(fā)酵完成后，發(fā)酵液經(jīng)高溫處理后分離、純化，得到槐糖脂。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，槐糖脂生產(chǎn)菌株為熊蜂生假絲酵母
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（1）中，將菌株在YPD瓊脂平板上劃線，平板在恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)24~48h后，挑取單菌落轉(zhuǎn)接到Y(jié)PD瓊脂平板上進(jìn)行二次活化，倒置培養(yǎng)24～48h至平板上長出清晰的單菌落。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，活化培養(yǎng)條件為：28~30℃，200rpm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，按照體積比2~4%的接種量將步驟（2）制得的種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，發(fā)酵培養(yǎng)基初始pH值為5.6~5.8，72h后pH控制為2.7~3.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，發(fā)酵罐攪拌速率為400~600rpm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3）中，發(fā)酵溫度為25℃。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，發(fā)酵時(shí)間為144~192h。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，發(fā)酵結(jié)束后將發(fā)酵液經(jīng)115℃高壓滅菌處理后倒入分液漏斗中，靜置使未利用油脂、發(fā)酵液、槐糖脂分層。
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