[發明專利]一種高效組織特異性表達RS1蛋白的重組腺相關病毒及應用

在審

• 申請號: 202110514036.1
• 申請日: 2021-05-12
• 公開（公告）號: CN113322281A
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發明（設計）人: 楊陽;魏于全
• 申請（專利權）人: 成都金唯科生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/864
• 分類號: C12N15/864;C12N15/12;C12N5/10;C12N7/01;A61K38/17;A61K48/00;A61P27/02
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

1.一種RS1蛋白表達框，其特征在于，由啟動子-目的基因序列-polyA組成，其中，所述的啟動子選自RK啟動子，目的基因選自野生型RS1基因或經密碼子優化的RS1基因中的任意一種，polyA選自rBG或bGH中的任意一種。

2.根據權利要求1所述的RS1蛋白表達框，其特征在于，所述的經密碼子優化的RS1基因核苷酸序列如SEQ ID NO.4中第645-1319bp所示。

3.根據權利要求1所述的RS1蛋白表達框，其特征在于，所述的啟動子選自RK啟動子，polyA選自bGH。

4.根據權利要求1所述的RS1蛋白表達框，其特征在于，啟動子、目的基因序列和polyA之間通過鍵或核苷酸連接序列連接。

5.根據權利要求1所述的RS1蛋白表達框，其特征在于，所述的RS1蛋白表達框的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

6.一種載體，其特征在于，所述載體含有權利要求1-5中任一項所述的RS1蛋白表達框。

7.根據權利要求6所述的載體，其特征在于，所述載體為腺相關病毒載體。

8.根據權利要求7所述的載體，其特征在于，所述載體選自以下任意一種的腺相關病毒載體：重組腺相關病毒載體血清型包括AAV1、AAV2、AAV3B、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAVrh10，優選AAV2、AAV5、AAV8或AAV9。

9.根據權利要求8所述的載體，其特征在于，所述的載體全序列如SEQ ID NO.4所示。

10.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞含有權利要求6-8中任一項所述的載體，或其染色體中整合有外源的權利要求1-5中任一項所述的RS1蛋白表達框。

11.一種組織特異性表達RS1蛋白的重組腺相關病毒，其特征在于是采用轉染試劑將AAV的Rep及Cap蛋白表達質粒、輔助質粒和權利要求6-8中任一項所述的載體共轉染HEK293細胞包裝制備得到。

12.權利要求1-5中任一項所述的RS1蛋白表達框或權利要求6-9中任一項所述的載體、權利要求10所述的宿主細胞、權利要求11所述的重組腺相關病毒在制備用于治療X連鎖的青少年視網膜劈裂癥的長效藥物中的應用。

13.一種藥物制劑，其特征在于，所述的制劑含有權利要求6-8中任一項所述的載體或權利要求10所述的重組腺相關病毒，以及藥學上可接受的載體或賦形劑。