[發明專利]類過氧化物納米酶及其制備方法、活性檢測方法及傳感器

有效

• 申請號: 202110507150.1
• 申請日: 2021-05-10
• 公開（公告）號: CN113237840B
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發明（設計）人: 宋嬋;劉海波;張琳琳;趙成龍;姚成
• 申請（專利權）人: 南京工業大學
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N21/64
• 代理公司: 深圳市君勝知識產權代理事務所(普通合伙) 44268
• 代理人: 徐凱凱

1.一種類過氧化物納米酶的制備方法，其特征在于，包括：

將MIL-101(Fe)放置于研缽中研磨，并對研磨后的MIL-101(Fe)在惰性氣體保護下進行煅燒處理，得到Fe₃O₄@C納米材料；

將Fe₃O₄@C納米材料與硫粉混合并研磨，對研磨后的Fe₃O₄@C納米材料與硫粉的混合物在惰性氣體保護下進行煅燒處理，得到類過氧化物納米酶，其中，煅燒處理條件為：以1～3℃/min的升溫速率升溫至550～650℃并保溫4.5～5.5h，所述類過氧化物納米酶為FeS@C納米片，所述類過氧化物納米酶中FeS納米顆粒的尺寸為380nm～420nm。

2.根據權利要求1所述的類過氧化物納米酶的制備方法，其特征在于，MIL-101(Fe)的煅燒處理條件為：以4～6℃/min的升溫速率升溫至450～550℃并保溫1.5～2.5h。

3.根據權利要求1所述的類過氧化物納米酶的制備方法，其特征在于，所述惰性氣體為氮氣或氬氣。

4.一種類過氧化物納米酶，其特征在于，采用如權利要求1～3任一項所述的類過氧化物納米酶的制備方法制備而成。

5.一種如權利要求4所述的類過氧化物納米酶的活性檢測方法，其特征在于，包括：

將類過氧化物納米酶加入含有3,3',5,5'-四甲基聯苯胺和H₂O₂的NaOAc-HAc緩沖溶液中并震蕩4～6min，得到FeS@C-TMB-H₂O₂比色體系；

將FeS@C-TMB-H₂O₂比色體系在45～55℃下孵育50～70min，并對孵育后的FeS@C-TMB-H₂O₂比色體系進行離心，取離心后的上清液進行紫外-可見光測試，得到紫外-可見吸收光譜；

根據所述紫外-可見吸收光譜，確定類過氧化物納米酶的過氧化物酶活性。

6.一種如權利要求4所述的類過氧化物納米酶的活性檢測方法，其特征在于，包括：

將類過氧化物納米酶加入含有10-乙酰基-3,7-二羥基吩嗪和H₂O₂的Tris-HCl緩沖溶液中并震蕩4～6min，得到FeS@C-AR-H₂O₂熒光體系；

將FeS@C-AR-H₂O₂熒光體系在25～35℃下孵育40～50min，并對孵育后的FeS@C-AR-H₂O₂熒光體系進行離心，取離心后的上清液進行熒光測試，得到熒光發射光譜；

根據所述熒光發射光譜，確定類過氧化物納米酶的過氧化物酶活性。

7.一種傳感器，其特征在于，所述傳感器用于對H₂O₂進行定量檢測，所述傳感器包括：比色H₂O₂傳感體系和/或熒光H₂O₂傳感體系，所述比色H₂O₂傳感體系包括如權利要求4所述的類過氧化物納米酶和3,3',5,5'-四甲基聯苯胺的HAc-NaAc緩沖液，所述熒光H₂O₂傳感體系包括如權利要求4所述的類過氧化物納米酶和10-乙酰基-3,7-二羥基吩嗪的Tris-HCl緩沖液。

8.根據權利要求7所述的傳感器，其特征在于，所述比色H₂O₂傳感體系對H₂O₂的檢測濃度范圍為1～70μM，檢出限為0.778μM；

所述熒光H₂O₂傳感體系對H₂O₂的檢測濃度范圍為5～250μM，檢出限為0.862μM。