[發明專利]抑制劑CNI-1493在豬繁殖與呼吸綜合征中的應用

有效

• 申請號: 202110503549.2
• 申請日: 2021-05-09
• 公開（公告）號: CN113133995B
• 公開（公告）日: 2022-09-02
• 發明（設計）人: 李華瑋;趙緒永;郭宏偉;井匯源;張立恒;鄭鳴
• 申請（專利權）人: 河南牧業經濟學院
• 主分類號: A61K31/167
• 分類號: A61K31/167;A61K47/54;A61P31/14;C12Q1/686;C12Q1/70
• 代理公司: 鄭州睿途知識產權代理事務所(普通合伙) 41183
• 代理人: 李伊寧

本申請屬于動物疾病預控技術領域，具體涉及抑制劑CNI?1493在豬繁殖與呼吸綜合征中應用專利申請事宜。作為eIF5A羥脯氨酸修飾的特異性抑制劑CNI?1493，將其處理細胞后，用于抑制PRRSV在細胞內的增殖；所述細胞為真核生物細胞。本申請中，發明以MARC?145細胞為例，在利用eIF5A羥脯氨酸修飾特異性抑制劑CNI?1493處理細胞后接種PRRSV，通過檢測PRRSV轉錄及蛋白水平變化情況以及PRRSV滴度的變化，初步認定抑制劑CNI?1493針對PRRSV具有一定的抑制作用。基于這一結果，可為PRRS的防控奠定一定的技術基礎，同時也為其他抗PRRSV藥物的篩選提供新的思路和借鑒。

技術領域

本申請屬于動物疾病預控技術領域，具體涉及抑制劑CNI-1493在豬繁殖與呼吸綜合征中應用專利申請事宜。

背景技術

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS）又稱藍耳病，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine Reproductive andRespiratory Syndrome Virus， PRRSV）引起的一種以母豬流產和各年齡段豬呼吸障礙為主要特征的病毒性傳染病。1987年該病首先在北美發現，此后在世界范圍內廣泛傳播，給養豬業帶來巨大損失。1995年我國首次報道PRRS以來，該病在國內長期流行，危害巨大，是影響我國養豬業的重大傳染病之一。PRRSV屬于套式病毒目（Nidovirales），動脈炎病毒科（Arteriviridae），動脈炎病毒屬（Arteriviridae），單股正鏈RNA病毒，基因組全長為15.4kb。病毒粒子呈球型，直徑為55～60納米。病毒有2個基因型，即PRRSV-1型和PRRSV-2型，我國流行的毒株主要為PRRSV-2型，PRRSV-1零星散發。

PRRS存在以下特征導致防控困難：一是存在持續性感染；二是亞臨床感染及偶然的疫情大爆發；三是病毒高度變異；四是抗體不能產生有效的免疫保護。針對PRRSV的防控，現有技術多是從豬場環境消毒、提高生豬免疫力等綜合性手段來進行。針對性的疫苗注射雖然可以提高生豬對PRRSV的抵抗力，但由于PRRSV變異較快，基因型、亞基因型多，因此使得疫苗的實際防控效果不夠理想。也因此，針對性開發相關防控治療用藥仍然是十分緊迫的科研任務。

真核生物翻譯起始因子（eukaryotic translation initiation factors，eIFs）是一類在真核生物蛋白翻譯過程中發揮重要作用的蛋白家族，目前已發現21個成員。大量研究表明，eIFs與多種病毒存在直接或間接的相互作用。病毒可以通過調控eIFs表達及修飾，抑制核糖體對宿主mRNA招募或影響翻譯起始復合體活性等方式，創造有利于自身復制的環境。由此，基于真核生物翻譯起始因子功能角度，開發相關病毒復制抑制藥劑，可為PRRS的防控提供一定的技術指導。

發明內容

通過對抑制劑CNI-1493在PRRSV防控中的研究，本申請目的在于提供一種防控PRRSV的新思路，同時也為相關藥物開發奠定一定技術基礎。

本申請所采取的技術方案詳述如下。

抑制劑CNI-1493在豬繁殖與呼吸綜合征中應用，作為eIF5A羥脯氨酸修飾的特異性抑制劑CNI-1493，將其處理細胞后，可以抑制PRRSV在細胞內的增殖；

所述細胞為真核生物細胞，具體例如為MARC-145細胞；

具體處理細胞時，以MARC-145細胞為例，抑制劑CNI-1493的用量為：0.1~100 μM，優選為0.1~10 μM；

所述抑制PRRSV在細胞內的增殖，通過采用Real-time PCR技術對PRRSV-N基因轉錄水平的表達情況進行檢測判定，具體檢測判定時，

針對PRRSV-N的引物序列設計如下：