[發(fā)明專利]一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法及應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110500332.6
• 申請日: 2021-05-08
• 公開（公告）號: CN113197918A
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳冬梅;吳炯;林峰;李莉;周寧;趙東海
• 申請（專利權(quán)）人: 奧鎂（上海）醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K9/19;A61P17/14;C12N5/0775
• 代理公司: 上海老虎專利代理事務(wù)所(普通合伙) 31434
• 代理人: 葛瑛

1.一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法，其特征在于：該基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法的具體步驟如下：

S1：獲取干細(xì)胞：從需要治療的對象身體上獲取間充質(zhì)干細(xì)胞組織，將獲取的間充質(zhì)干細(xì)胞組織置于生理鹽水中洗凈；

S2：培養(yǎng)干細(xì)胞：將步驟S1中洗凈的間充質(zhì)干細(xì)胞組織獲取，置于培養(yǎng)基中培養(yǎng)，直至間充質(zhì)干細(xì)胞組織培養(yǎng)至P3-P5代；

S3：轉(zhuǎn)移培養(yǎng)干細(xì)胞：將步驟S2中培養(yǎng)至P3-P5代的間充質(zhì)干細(xì)胞組織獲取，并將間充質(zhì)干細(xì)胞組織剪碎，將剪碎后的間充質(zhì)干細(xì)胞組織置于新的培養(yǎng)基中，對剪碎后的間充質(zhì)干細(xì)胞組織繼續(xù)培養(yǎng)；

S4：獲取干細(xì)胞外泌體：將步驟S3中培養(yǎng)后的剪碎間充質(zhì)干細(xì)胞組織上清液獲取，通過多重離心的方式得到干細(xì)胞外泌體；

S5：制作干細(xì)胞外泌體凍干粉：將步驟S4中得到的干細(xì)胞外泌體獲取，將干細(xì)胞外泌體與淀粉按照質(zhì)量比重為1：10-20的比例配比，凍干得到干細(xì)胞外泌體凍干粉；

S6：經(jīng)皮下注射：使用時(shí)，將干細(xì)胞外泌體凍干粉取出并注入維生素、生理鹽水和胰島素溶化，溶化的液體藥劑中維生素、生理鹽水和胰島素分別占有：維生素1μg/mg、生理鹽水8-10μg/mg、胰島素5-7μg/mg，對需要治療的對象經(jīng)皮下注射。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法，其特征在于：所述間充質(zhì)干細(xì)胞組織來自于臍帶、牙髓、脂肪、骨髓骨膜、各器官組織的血管壁或者臍帶組織中的間充質(zhì)干細(xì)胞組織。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法，其特征在于：所述步驟S1中間充質(zhì)干細(xì)組織在生理鹽水中預(yù)先浸泡2-3min，之后采用玻璃棒對生理鹽水?dāng)噭?dòng)，對其內(nèi)的間充質(zhì)干細(xì)胞組織清理，攪動(dòng)速度為30r/min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法，其特征在于：所述步驟S3中間充質(zhì)干細(xì)胞組織剪碎呈尺寸為2-4mm的段狀。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法，其特征在于：所述步驟S3中對剪碎后的間充質(zhì)干細(xì)胞組織繼續(xù)培養(yǎng)過程中，每30min對培養(yǎng)基及內(nèi)部的剪碎間充質(zhì)干細(xì)胞組織晃動(dòng)，使得剪碎間充質(zhì)干細(xì)胞組織充分接觸氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法，其特征在于：所述步驟S4中多重離心的方式具體為：將上清液置于離心機(jī)中，通過設(shè)定離心機(jī)轉(zhuǎn)速為400-600r/min，初步過濾去大量大顆粒細(xì)胞碎片物質(zhì)；之后，設(shè)定離心機(jī)轉(zhuǎn)速為800-1000r/min，得到純凈干細(xì)胞外泌體。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的方法，其特征在于：所述步驟S5中凍干方式為：降低溫度至零下20-零下10℃，且凍干在無菌環(huán)境中進(jìn)行，待干細(xì)胞外泌體與淀粉冷凍后，通過負(fù)壓抽真空的方式將干細(xì)胞外泌體與淀粉內(nèi)的水分升華分離。

8.一種基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)的應(yīng)用，其特征在于：該基于干細(xì)胞的毛發(fā)再生技術(shù)應(yīng)用于脫發(fā)小鼠，具體如下：

S1：獲取患有脫發(fā)的小鼠：將患有脫發(fā)癥狀的飼養(yǎng)小白鼠取出；

S2：按劑量經(jīng)皮下注射藥劑：根據(jù)小白鼠年齡、體重對小白鼠選用對應(yīng)劑量的藥劑并注射；

S3：觀察小鼠情況：每隔7天對小白鼠注射一次藥劑，期間觀察小白鼠脫發(fā)處生長情況。