[發明專利]一種用于蘭花盆土清潔的微生物菌劑的制備方法及得到的生物菌劑和應用

在審

• 申請號: 202110499900.5
• 申請日: 2021-05-08
• 公開（公告）號: CN113293108A
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發明（設計）人: 張棟粥;楊世民;黃雪麗;倪蘇;劉帆;邱玉潔;蔡誠誠
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01B79/00;C12R1/01
• 代理公司: 成都弘毅天承知識產權代理有限公司 51230
• 代理人: 軒勇麗

1.一種用于蘭花盆土清潔的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：提取分離：將長勢良好的蘭花的栽培植料每50g倒入滅過菌的容器，往其中加入0.5-1.5L無菌水，進行浸提1-3h，浸提完成后，取浸提液10-20ml，進行離心提取分離，取上清液5-15mL為提取分離的菌液，后置于3-5℃下保存；

步驟2：利用稀釋涂布平板法培養菌液里細菌的單個菌落，至少涂布10個平板，至于25-30℃黑暗的條件下培養；

步驟3：在培養的平板上篩選出至少10種單個菌落數較多的細菌種類，將篩選出的種菌進行擴繁，配制5-15L擴繁培養基，將擴繁培養基平均分成5-15份，每份0.5-1.5L，將篩選出的每個種菌分別加入一個擴繁培養基中培養，搖勻，密封，置于25-30℃的黑暗環境下，培養15-30d后得到純化的菌液；

步驟4：將得到的篩選出的種菌的純化的菌液進行蘭花盆土清潔實驗，分別將每種菌的純化的菌液稀釋150-250倍，選擇植料有腐敗氣味的蘭花，將液稀的純化的菌液對蘭花盆土進行灌盆，每種液稀的純化的菌液處理3-8盆，8-12d一次，25-35d后脫盆觀察；

步驟5：通過提取分離、篩選、分離、擴繁實驗，直至處理的植料無任何異味，篩選出此菌，即為蘭花盆土清潔專用菌。

2.根據權利要求1所述的一種用于蘭花盆土清潔的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，步驟1中的離心提取分離具體為在離心機2500-3500r/min條件下離心5-15min，進行提取分離。

3.根據權利要求1所述的一種用于蘭花盆土清潔的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，所述稀釋涂布平板法采用的培養基配方為每NH₄Cl 0.5-1.5g/L，添加NaHCO₃ 0.5-1.5g/L，K₂HP₄ 0.1-0.3g/L，NaCl 1-3g/L，酵母膏0.05-0.2g/L，瓊脂15-25g/L，后調節PH為6.5-7.5。

4.根據權利要求1所述的一種用于蘭花盆土清潔的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，步驟3中擴繁培養基配方為每NH₄Cl 0.5-1.5g/L，添加K₂HPO₄0.1-0.3g/L，CH₃COONa 2-3g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1-0.3g/L，NaCl1-3 g/L，FeCl₃·6H₂O 3-7mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.03-0.07mg/L，MnCl₂·4H₂O 0.03-0.07mg/L，ZnSO₄·7H₂O 0.5-1.5mg/L，Co(NO₃)₂·6H₂O 0.03-0.07mg/L，維生素B1 0.001mg/L，調節PH為6.5-7.5。

5.根據權利要求1所述的一種用于蘭花盆土清潔的微生物菌劑的制備方法，其特征在于，步驟1中栽培植料為樹皮和植金石，樹皮和植金石的重量比為(2-6):1。

6.一種權利要求1-5任一項所述的制備方法制備的微生物菌劑。

7.一種權利要求6所述的微生物菌劑在蘭花盆土清潔中的應用。