[發明專利]一株皮特不動桿菌及其應用

有效

• 申請號: 202110499897.7
• 申請日: 2021-05-08
• 公開（公告）號: CN113234625B
• 公開（公告）日: 2022-05-24
• 發明（設計）人: 王繼華;李梓維;張馨予
• 申請（專利權）人: 哈爾濱師范大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;B09C1/10;C12R1/01;C02F101/34;C02F101/36
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 李紅媛

一株皮特不動桿菌及其應用，本發明涉及一株皮特不動桿菌及其應用。本發明的目的是為了提供一株降解2,2’,4,4’?四溴聯苯醚的皮特不動桿菌，本發明一株皮特不動桿菌為皮特不動桿菌(Acinetobacterpittii)GB?2，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址是中國武漢市武漢大學，保藏日期是2021年1月19日，保藏編號為CCTCCNo.M2021107。本發明篩選的菌株皮特不動桿菌GB?2可用于被BDE?47污染的水體和土壤的生物修復，具有較高的應用價值。本發明應用于環境微生物技術領域。

技術領域

本發明涉及一株皮特不動桿菌及其應用。

背景技術

多溴聯苯醚(PBDEs)是持久性有機污染物的一種，作為一種重要的添加型阻燃劑被廣泛應用于各種行業，如塑料、電子電器、家具、室內裝飾、交通、石油和采礦等領域，并且在各種環境介質中被檢出。PBDEs共有209種同系物，2,2’,4,4’-四溴聯苯醚(BDE-47)雖不是環境中含量最多的PBDEs同系物，但卻是分布最廣、在生物體中含量最高、對人體和動物毒性最強的PBDEs之一。BDE-47不僅具有高度親脂性、持久性、生物蓄積性、可遷移性，還可隨著食物鏈在生物體和人體內富集，對生物具有毒害作用。因此，研究BDE-47的生物降解可加快降解，對于保護環境健康和降低人類安全風險具有重要意義。

由于BDE-47的長期使用，以及近年來含BDE-47的各種電子垃圾的非法拆解，導致其通過揮發、沉降等方式隨降水、地表徑流滲入土壤。目前，國內外對于降解BDE-47主要采用的方法有光降解法、植物降解法、生物降解法及零價鐵還原法，在諸多的降解技術方法研究過程中，微生物降解因具有效果顯著、技術成本低且無二次污染等特點，被認為是當前最具有前景的手段之一。

微生物降解是指在微生物作用下，大分子有機物轉變成小分子化合物、有機物徹底分解轉化為二氧化碳和水，被認為是環境中去除持久性有機污染物的主要途徑。目前所獲得的微生物中，能夠降解BDE-47的微生物并不多且降解效果不顯著，針對于此，篩選BDE-47的高效降解菌是對BDE-47污染進行環境治理和修復研究的熱點問題，從而為降低和消除BDE-47污染土壤問題奠定基礎。

發明內容

本發明的目的是為了提供一株降解2,2’,4,4’-四溴聯苯醚的皮特不動桿菌。

本發明一株皮特不動桿菌為皮特不動桿菌(Acinetobacter pittii)GB-2，保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏地址是中國武漢市武漢大學，保藏日期是2021年1月19日，保藏編號為CCTCC No.M 2021107。

本發明一株皮特不動桿菌在降解環境污染物中的應用，其中環境污染物為2,2’,4,4’-四溴聯苯醚。

本發明采用浙江省臺州市路橋區峰江鎮電子拆解工業園區被BDE-47污染的土壤，取新鮮土壤(取樣深度為0-20cm)，在采集過程中除掉樣品中雜質，置于無菌袋當中，放入冰盒帶回實驗室，于4℃冰箱進行保存保存，用于傳統微生物培養。BDE-47好氧降解菌株的馴化、分離及篩選：

①將從電子垃圾拆解場地采集的土壤過篩，稱取10g，放置于帶有玻璃珠的錐形瓶中，加入以BDE-47為唯一碳源的菌株篩選培養基，于35℃，150rpm的振蕩培養箱中培養，使細菌呈單細胞狀態分散于液體中，與營養物質充分接觸；

②從錐形瓶內的菌懸液中吸取10mL，轉接至90mL新配置的BDE-47菌株篩選培養基中，在相同條件下進行傳代培養，重復上述步驟，進行幾個周期的培養；

③采用污染物濃度梯度馴化法進行菌株馴化：細菌馴化體系中BDE-47的濃度按10μg/L、20μg/L、50μg/L、100μg/L依次增加，7d為一個馴化周期，馴化共四個周期；

④再采用最大污染物濃度馴化法進行菌株馴化：細菌馴化體系BDE-47濃度為100μg/L，7d為一個馴化周期，馴化共四個周期，得到可以以BDE-47為唯一碳源的生長的菌群；