[發明專利]一種減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米載體的制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110497148.0
• 申請日: 2021-05-07
• 公開（公告）號: CN113384551B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 陳鑫;郭曉燕;袁萍耘;于小倩;劉濤
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/10;A61K47/02;A61K31/198;A61K31/223;A61P35/00
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 安彥彥

1.一種減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米粒子的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)向氫氧化鈉和鈣離子捕獲劑的混合溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺的混合溶液，得到混合物，然后將混合物的pH值調節至5.0～6.0后添加至修飾氨基的金納米粒子溶液中，在室溫下反應8～24小時，透析，得到修飾有鈣離子捕獲劑的金納米粒子溶液；其中，鈣離子捕獲劑為乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸或1,2-雙(2-氨基苯氧基)乙烷-N,N,N',N'-四乙酸四(乙酰氧基甲酯)；

2)將三乙胺和單溴聚乙二醇的混合溶液加入到修飾有鈣離子捕獲劑的金納米粒子溶液中，攪拌下反應1～3天，透析，得到鈣離子捕獲劑被聚乙二醇保護的仿生納米粒子溶液；其中，三乙胺和單溴聚乙二醇的混合溶液中三乙胺濃度為0.01mol/L，單溴聚乙二醇濃度為0.075mol/L；

三乙胺、單溴聚乙二醇與修飾鈣離子捕獲劑的金納米粒子溶液的體積比為1：1：60～1：1：120；

3)將1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺和腫瘤靶向劑的混合溶液加入到鈣離子捕獲劑被聚乙二醇保護的仿生納米粒子溶液中，攪拌下反應1～3天，透析，得到具有靶向腫瘤功能的鈣離子捕獲仿生納米粒子溶液；其中，腫瘤靶向劑是葉酸或透明質酸。

2.根據權利要求1所述的減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米粒子的制備方法，其特征在于，步驟1)中，氫氧化鈉和鈣離子捕獲劑的混合溶液中氫氧化鈉濃度為0.075mol/L，鈣離子捕獲劑濃度為0.025mol/L；

1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺的混合溶液中1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺濃度為0.05mol/L，N-羥基琥珀酰亞胺濃度為0.025mol/L；

氫氧化鈉和鈣離子捕獲劑的混合溶液、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺混合溶液與修飾氨基的金納米粒子溶液的體積比為1：1：60～1：1：120。

3.根據權利要求1所述的減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米粒子的制備方法，其特征在于，步驟1)中，修飾氨基的金納米粒子溶液通過以下過程制得：將0.025mol/L的巰基乙胺溶液添加至金納米粒子溶液中，反應2～6小時，透析，得到修飾氨基的金納米粒子溶液；其中，巰基乙胺溶液和金納米粒子溶液的體積比為1：60～1：120。

4.根據權利要求3所述的減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米粒子的制備方法，其特征在于，金納米粒子溶液通過以下過程制得：將0.01mol/L的氯金酸溶液添加到超純水中，加熱至沸騰后，加入0.01mol/L的檸檬酸鈉溶液，繼續加熱至沸騰，在沸騰狀態下反應10～120分鐘，得到金納米粒子溶液；其中，氯金酸溶液、超純水和檸檬酸鈉溶液的體積比為1：20：2～1：40：2。

5.根據權利要求1所述的減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米粒子的制備方法，其特征在于，步驟2)中，單溴聚乙二醇的分子量是1000～6000。

6.根據權利要求1所述的減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米粒子的制備方法，其特征在于，步驟3)中，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺和腫瘤靶向劑的混合溶液中1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺濃度為0.02mol/L，N-羥基琥珀酰亞胺濃度為0.01mol/L，腫瘤靶向劑濃度為0.01mol/L；

1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺、N-羥基琥珀酰亞胺和腫瘤靶向劑的混合溶液與鈣離子捕獲劑被聚乙二醇保護的仿生納米粒子溶液的體積比為1：60～1：120；

步驟1)、2)與3)中的透析時間均為12～36小時。

7.一種根據權利要求1-6中任意一項所述方法制備的減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米粒子，其特征在于，該仿生納米粒子粒度小于等于10nm，具有酯酶響應的鈣離子捕獲能力。

8.一種根據權利要求1-6中任意一項所述方法制備的減少腫瘤內過量鈣離子的仿生納米粒子在制備用于抗腫瘤藥物中的應用。