[發(fā)明專利]植物核酸提取與糖蜜處理結(jié)合的處理方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110496017.0
• 申請(qǐng)日: 2021-05-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113215144B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-07-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李夢(mèng)琦;陳玉琦;曾崢;林茂沖
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 珍奧集團(tuán)股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/10
• 分類號(hào): C12N15/10;C12N1/16
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責(zé)任公司 21212
• 代理人: 周媛媛;李馨

本發(fā)明公開(kāi)了一種植物核酸提取與糖蜜處理相結(jié)合的方法，屬于核酸制備技術(shù)領(lǐng)域。將天然植物原料的核酸提取過(guò)程中收集到的中間產(chǎn)物及廢液合理應(yīng)用到酵母培養(yǎng)基糖蜜處理關(guān)鍵步驟中，使得兩種工藝有機(jī)結(jié)合起來(lái)，所述方法不僅提取了所需的植物核酸原料，而且解決了提取過(guò)程中中間產(chǎn)物的處理問(wèn)題，利用此方法處理所得的發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵速率相較于普通酸法處理的發(fā)酵培養(yǎng)基明顯提升，所得酵母核酸含量明顯增加，因此，本發(fā)明提供了一種原料提取和廢液利用的綜合工藝。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于核酸制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及植物核酸提取與糖蜜處理結(jié)合的處理方法。

背景技術(shù)

核糖核酸(RNA)是一類十分重要的生物大分子，在基因的表達(dá)和蛋白質(zhì)的生物合成起著關(guān)鍵的作用。隨著科研水平的提高，核糖核酸在醫(yī)藥、保健品、食品加工和化妝品等方面的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。在最新的醫(yī)學(xué)研究表明，核糖核酸(RNA)可激活人體的T細(xì)胞及B細(xì)胞的活性，對(duì)于一些與人體免疫功能下降有關(guān)的疾病如慢性支氣管炎、哮喘病、慢性乙型肝炎以及部分癌癥有顯著的療效。另外通過(guò)對(duì)反義核酸的核酸骨架、核糖、堿基及其末端引入各種基團(tuán)后用于治療，能夠有效的抑制腫瘤或病毒細(xì)胞基因的轉(zhuǎn)錄與翻譯等，對(duì)人類未來(lái)攻克此類頑疾提供了無(wú)限可能。

目前工業(yè)上生產(chǎn)RNA最常用原料是酵母菌，酵母中核糖核酸(RNA)含量較多，一般在6％～9％，脫氧核糖核酸(DNA)很少，一般為0.03～0.516％，因此，提取RNA以酵母為原料較為為理想。酵母生長(zhǎng)所需碳源、氮源、生長(zhǎng)因子和無(wú)機(jī)離子都由發(fā)酵培養(yǎng)基提供，選取合適的培養(yǎng)基不僅可以加速酵母發(fā)酵時(shí)間，提高原料利用率，還可以增加酵母的核酸、多糖等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量。為降低生產(chǎn)成本，當(dāng)前培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基中最常見(jiàn)原料為糖蜜，糖蜜為產(chǎn)糖的副產(chǎn)品，價(jià)格低廉，是一種理想的發(fā)酵原料。其中含有可發(fā)酵糖30-60％，主要為蔗糖，還含有維生素、礦物質(zhì)、菌體蛋白、核酸、表面活性物及促生長(zhǎng)因子(生物活性物質(zhì))等成分。但是，糖蜜不可以直接作為發(fā)酵培養(yǎng)基使用，因?yàn)槠渲羞€有膠質(zhì)、焦糖、黑色素組成的膠體物質(zhì)，發(fā)酵過(guò)程中會(huì)吸附在酵母細(xì)胞上從而抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)，同時(shí)還會(huì)在發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生大量氣泡，影響發(fā)酵效率。所以在發(fā)酵前，必須對(duì)糖蜜進(jìn)行預(yù)處理。

直接以植物為原材料提取核糖核酸也是本領(lǐng)域獲得核糖核酸的另一主要的途徑，以植物為原料提取核酸的方法主要有：堿提取法、酚提取法、氯仿-異戊醇提取法、電泳提取法等。盡管此類方法可以提純出較高濃度的DNA和RNA，但是由于其所需材料成本昂貴、工藝繁雜、原料的綜合利用率低，基本上不適合大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)，并且產(chǎn)生的廢水很難被利用，嚴(yán)重污染環(huán)境。利用核酸含量豐富的植物原料，探索提取率高、成本低、無(wú)污染、綜合利用的核酸提取工藝仍是當(dāng)務(wù)之急。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，本發(fā)明的目的是提供一種將植物核酸提取與發(fā)酵培養(yǎng)基處理有機(jī)結(jié)合的處理方法，所述方法使用新的工藝提取天然植物原料中的核酸，利用植物核酸提取過(guò)程中的中間產(chǎn)物對(duì)糖蜜液進(jìn)行預(yù)處理，結(jié)合超聲波處理，直接獲得酵母發(fā)酵所需的培養(yǎng)基。所述方法不僅提取了所需的植物核酸原料，而且解決了提取過(guò)程中中間產(chǎn)物的處理問(wèn)題，利用此方法處理所得的發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵速率相較于普通酸法處理的發(fā)酵培養(yǎng)基明顯提升，所得酵母核酸含量明顯增加，因此該方法是一種可實(shí)現(xiàn)的節(jié)能環(huán)保新工藝。

本發(fā)明目的是通過(guò)以下方式實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明提供了一種植物核酸提取與糖蜜處理相結(jié)合的方法，所述方法包括植物核酸提取過(guò)程和利用植物核酸提取的中間產(chǎn)物對(duì)酵母培養(yǎng)基所用的糖蜜進(jìn)行處理過(guò)程；所述植物核酸提取過(guò)程包括如下步驟：

1)將浸泡的植物原料于冰上研磨至粒徑80～120目，加入0.5～2倍重量的蒸餾水，于-10～-30℃的溫度下冷凍12～24h；

2)將步驟1)得到的冷凍物解凍至半融狀態(tài)，研磨至粒徑160～200目，加入5～10倍重量的蒸餾水，邊加邊攪拌，離心取上清液；