[發明專利]一種將家蠶素斑品種定向轉育成茶斑限性系統的雌回交法

有效

• 申請號: 202110495586.3
• 申請日: 2021-05-07
• 公開（公告）號: CN113080153B
• 公開（公告）日: 2023-02-28
• 發明（設計）人: 廖鵬飛;董占鵬;代方銀;魯成;劉敏;李繼婭;羅順高;李濤;范永慧;歐秀華;李瓊艷;白紅英;楊繼芬;朱紅濤;楊文;李紅;李剛;羅智明
• 申請（專利權）人: 云南省農業科學院蠶桑蜜蜂研究所;西南大學
• 主分類號: A01K67/04
• 分類號: A01K67/04
• 代理公司: 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308
• 代理人: 王紅霞

1.一種將家蠶素斑品種定向轉育成茶斑限性系統的雌連續回交法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

(1)用普斑限性品種的雌與基礎普茶品種的雄ZZ+p/+pL/L雜交，得F₁代；

(2)F₁代雌雄各有1種基因型和1種表現型，雌基因型為表現型為深普茶斑；雄基因型為ZZp/+p+L/L，表現型為普茶斑，將F₁代混合育至上蔟結繭，削繭鑒蛹后留雌汰雄ZZp/+p+L/L，用雌與輪回親本素斑品種雄ZZp/p+L/+L雜交，得F₂代；

(3)F₂代有ZZp/p+L/+L、ZZ+p/p+L/+L、ZZ+p/pL/+L和ZZp/pL/+L 8種基因型，有普斑、深普斑、深普茶斑、素斑、普茶斑和姬茶斑6種表現型，將F₂代混合育至4齡后，淘汰深普斑、普斑和素斑3種非茶斑個體，選留深普茶斑、普茶斑和姬茶斑3種茶斑個體繼續飼養至上蔟結繭，削繭鑒蛹后留雌和汰雄ZZ+p/pL/+L和ZZp/pL/+L，用雌與輪回親本素斑品種雄ZZp/p+L/+L回交，得BC₁代；

(4)將BC₁代單蛾育至4齡后，將僅有普茶斑、姬茶斑、普斑和素斑4種表現型的蛾區標記為蛾區1型，將有深普茶斑、普茶斑、姬茶斑、深普斑、普斑和素斑6種表現型的蛾區標記為蛾區2型，將蛾區2型整區淘汰，選留蛾區1型，并將蛾區1型中的普斑和素斑2種非茶斑個體淘汰，將普茶斑和姬茶斑2種茶斑個體繼續飼養至上蔟結繭，削繭鑒蛹后留雌汰雄ZZp/p+L/L，用雌與輪回親本素斑品種雄ZZp/p+L/+L回交，得BC₂代；

(5)BC₂代有ZZp/p+L/+L和ZZp/p+L/L 4種基因型，有普斑、普茶斑、素斑和姬茶斑4種表現型，將其混合育至4齡后，淘汰普斑和素斑2種非茶斑個體，選留普茶斑和姬茶斑2種茶斑個體繼續飼養至上蔟結繭，通過削繭鑒蛹留雌汰雄ZZp/p+L/L，用雌與輪回親本素斑品種雄ZZp/p+L/+L回交得BC₃代；

(6)BC₃代后按步驟(5)操作，混合育至4齡后，淘汰普斑和素斑2種非茶斑個體，選留普茶斑和姬茶斑2種茶斑個體繼續飼養至上蔟結繭，通過削繭鑒蛹留雌汰雄ZZp/p+L/L，用雌與輪回親本素斑品種的雄ZZp/p+L/+L連續回交n次得BC_n代，n≥5；

(7)將BC_n代混合育至4齡后，淘汰普斑和素斑2種非茶斑個體，選留普茶斑和姬茶斑2種茶斑個體繼續飼養至上蔟結繭，其中普茶斑為雌，基因型為姬茶斑為雄，基因型為ZZp/p+L/L，通過削繭鑒蛹將雌雄分開，用雌與雄自交得S₁代；

(8)S₁代有ZZp/p+L/+L、ZZp/p+L/L和ZZp/pL/L 6種基因型，有普斑、普茶斑、素斑和姬茶斑4種表現型，混合飼育至4齡后，依然淘汰普斑和素斑2種非茶斑個體，選留普茶斑和姬茶斑2種茶斑個體繼續飼養至上蔟結繭，削繭鑒蛹將雌雄分開，雌的基因型為雄的基因型為ZZp/p+L/L、ZZp/pL/L，雌與雄自交得到S₂代；

(9)S2代會分化出2種基因型、4種基因型和6種基因型，按基因型數量劃分蛾區的類型，將僅有ZZp/pL/L 2種基因型的蛾區用類型1表示，將ZZp/pL/L和ZZp/p+L/L 4種基因型的蛾區用類型2表示，將有ZZp/p+L/+L、ZZp/p+L/L和ZZp/pL/L 6種基因型的蛾區用類型3表示，S₂代單蛾育至4齡后，將出現普斑和素斑的蛾區，即類型3整區淘汰；將僅有普茶斑和姬茶斑兩種表現型的蛾區，即類型1和類型2隨機編號后繼續飼養至上蔟結繭，通過削繭鑒蛹將雌雄分開，進行蛾區內雌雄自交得S₃代；

(10)S₃代按步驟(9)的蛾區的類型進行蛾區內的混合育，將出現普斑和素斑的蛾區整區淘汰，選留僅有普茶斑和姬茶斑的蛾區，即轉育得到能在家蠶幼蟲發育至3齡時準確鑒別雌雄的茶斑限性系統。