[發明專利]抗纖維蛋白-2抗體序列、四肽鏈分子及免疫球蛋白分子

有效

• 申請號: 202110492817.5
• 申請日: 2021-05-07
• 公開（公告）號: CN113173989B
• 公開（公告）日: 2022-09-06
• 發明（設計）人: 王建琳;尹燕博;徐守振;曲雪婷;高倩文
• 申請（專利權）人: 青島農業大學
• 主分類號: C07K16/08
• 分類號: C07K16/08;C12N15/13;C12N15/70;G01N33/569;A61P31/20
• 代理公司: 北京匯捷知識產權代理事務所(普通合伙) 11531
• 代理人: 盛君梅

本發明屬于病毒蛋白抗體技術領域，公開了一種抗纖維蛋白?2抗體序列、四肽鏈分子及免疫球蛋白分子，所述病毒蛋白抗體序列包括：所述重鏈可變區的氨基酸序列為SEQ ID NO：1，所述核苷酸序列為SEQ ID NO：3；所述輕鏈可變區的氨基酸序列為SEQ ID NO：2，所述核苷酸序列SEQ ID NO：4。本發明提供的雞源化抗血清4型禽腺病毒纖維蛋白?2抗體的重鏈、輕鏈的可變區氨基酸序列和核苷酸序列，為構建高親和力、低免疫原性的雞源化抗血清4型禽腺病毒纖維蛋白?2的基因工程抗體提供支持，對推動血清4型禽腺病毒感染的診斷和雞源化抗體藥物的發展具有重要意義。

技術領域

本發明屬于病毒抗體技術領域，尤其涉及一種抗血清4型禽腺病毒纖維蛋白-2抗體序列、四肽鏈分子、免疫球蛋白分子及應用。

背景技術

血清4型禽腺病毒屬于禽腺病毒科禽腺病毒屬無囊膜的雙鏈線性DNA病毒，外形呈立體對稱的二十面體、無囊膜，直徑為70-90nm。根據抗原性不同，禽腺病毒可分為禽腺病毒-I群(Fowl adenovirus，FAdVs)、II群和III群。根據分子特征和限制性內切酶分析，FAdVs可分為A-E 5個種，根據血清交叉中和試驗結果可分為12個血清型(即1-8a和8b-11)。FAdVs感染雞主要引起肌胃糜爛、包涵體肝炎和心包積液-肝炎綜合征等，同時還造成生長緩慢和長時間免疫抑制導致繼發感染增加。近年來，國內外FAdVs感染呈現明顯增加的趨勢，給肉雞養殖業造成了嚴重的經濟損失。

FAdVs感染雞可出現多種病理變化，如雞包涵體肝炎、肝炎-心包積液綜合征、肌胃糜爛等，其中雞包涵體肝炎主要由血清2、7、8a、8b和II型FAdVs感染引起，發病率高達60-70％，被感染雞出現突然死亡，死亡率為10-30％；雞肝炎-心包積液綜合征由血清4型FAdVs感染引起，主要感染3-6周齡肉雞，死亡率為30-70％；肌胃糜爛主要由血清I型FAdVs感染引起，死亡率為3-8％。血清4型FAdVs感染已成為嚴重影響我國養禽業的重要疾病，給我國養雞業造成了巨大的經濟損失。

針對FAdVs感染的診斷和疫苗研究已有報道。目前，檢測FAdVs的經典方法主要有病毒的分離鑒定、病毒中和實驗等；在實際生產中，以分子生物為基礎的PCR檢測方法是進行病原測定的主要方法，如針對六鄰體蛋白基因和纖維蛋白基因進行的PCR方法、針對六鄰體蛋白基因進行的PCR-RFLP分型方法等是目前主要的診斷方法。研究報道有FAdVs滅活疫苗、針對六鄰體蛋白和纖維蛋白-2構建的亞單位疫苗等。但有關FAdVs的血清學診斷方法和生物學治療方法較少，僅見個別卵黃抗體的研究報道。

鑒于血清4型FAdVs感染造成的嚴重經濟損失，且目前仍無較好的血清學診斷方法和有效治療藥物。因此，為了更好地診斷和治療該病，研制出抗體效價高、特異性好的抗體用于實驗室研究和臨床疾病的血清學診斷；研制出免疫保護率高、安全性好、成本低廉、適用于商業化生產的抗血清4型FAdVs的抗體用于臨床該病的治療，具有重要的意義。

通過上述分析，現有技術存在的問題及缺陷為：有關FAdVs的血清學診斷方法和生物學治療方法較少，僅見個別卵黃抗體的研究報道，且目前仍無較好的血清學診斷方法和有效治療藥物。

解決以上問題及缺陷的難度為：要想得到一定規模的抗體庫，首先要做的是借助PCR技術，獲取機體本源的全套抗體基因，目前關于雞源抗體基因序列報道較少，需要我們對抗體輕、重鏈可變區序列進行多對引物驗證。

解決以上問題及缺陷的意義為：有利于篩選到針對特異性抗原的抗體，對后續診斷及治療效果會更有優勢。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明提供了一種抗血清4型禽腺病毒纖維蛋白-2抗體序列、四肽鏈分子、免疫球蛋白分子及應用。

本發明是這樣實現的，一種抗血清4型禽腺病毒纖維蛋白-2抗體序列，所述抗體序列包括：