[發明專利]一種用于真菌毒素生產的混合培養基的配制方法

有效

• 申請號: 202110488779.6
• 申請日: 2021-04-30
• 公開（公告）號: CN113234604B
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 徐永威;趙志輝;韓錚;郭文博;譚曉杰;郟征偉
• 申請（專利權）人: 裕菁科技(上海）有限公司;上海市農業科學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;C12R1/645
• 代理公司: 上海段和段律師事務所 31334
• 代理人: 李佳俊;郭國中

本發明公開了一種用于真菌毒素生產的混合培養基的配制方法；通過采用淀粉類、油料類農副產品、農作物秸稈或殘渣以及水為主要原料，經過特定加工后，獲得一種新型的混合培養基；該培養基經高溫滅菌后，可用于真菌培養，并進行相關真菌毒素的生產。本發明的培養基解決了目前單獨采用一種農作物如大米、玉米為主要原料作為真菌培養基用于真菌培養進而獲得真菌毒素方法中毒素產量低，選擇性差、后處理復雜等問題，采用該發明中混配的培養基用于真菌培養進而生產真菌毒素，具有毒素產率高，選擇性好，后處理簡單，價格低廉的優點。

技術領域

本發明涉及培養基及其配制，具體涉及一種用于真菌毒素生產的混合培養基的配制方法。

背景技術

真菌廣泛分布于自然界，種類繁多、數量龐大，與人類關系十分密切，有許多真菌對人類有益，而有些真菌對人類有害。真菌毒素是真菌產生的次級代謝產物。目前已知有300多種不同的真菌毒素。對人類危害嚴重的真菌毒素常見的主要有十幾種，其中包括黃曲霉毒素(AFB1、AFB2、AFG1、AFG2等)、展青霉毒素(PAT)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、橘霉素(citrimin)和脫氧雪腐鐮刀菌烯(DON)、伏馬毒素B1、B2、B3(FB1、FB2、FB3)、赭曲霉毒素、T-2毒素等。

不同真菌可以產生相同的毒素，如黃曲霉和寄生曲霉都產生AFT；蓖麻青霉和棒形青霉都產青霉素。同一菌株由于培養基的不同其產毒能力也有很多的差別。

通過對現有專利文獻的檢索發現：

CN101914586公開了一種DON毒素的制備純化方法，其利用禾谷鐮刀菌生產DON毒素，使用的種子培養基為蔗糖1％、硝酸銨0.2％、硫酸鎂0.05％、硫酸鐵0.02％、磷酸二氫鉀0.2％、蛋白胨0.4％、酵母浸膏0.2％、余量為水，使用的發酵培養基為硝酸銨0.1％、磷酸二氫鉀0.3％、硫酸鎂0.05％、氯化鈉0.4％、蔗糖2％、甘油1％、硫酸鋅0.002％、余量為水。

CN101736032公開了一種用尖孢鐮刀菌培養毒素的方法及其作為除草劑的應用，其中尖孢鐮刀菌培養時采用的固體培養基為：3-8％麥麩、0.5-5％豆餅粉、0.5-5％麥粉、0.1-2％硫酸銨、0-0.3％磷酸二氫鉀、0-0.2％硫酸鎂，自來水配制，控制pH＝5.5。

CN103421857公開了一種單端孢霉烯B族毒素的合成方法，其使用的產毒培養基為大米培養基：取市售的商品秈米粒100g，加水50ml，浸泡過夜后，在121℃高壓蒸汽下滅菌每次30分鐘，每天一次，共兩天。

CN103397058A公開了一種高效制備脫氧雪腐鐮刀烯醇的方法，使用固體培養基進行生產培養；該固體培養基包括但不限于大米、玉米、小麥、燕麥、蕎麥、高粱等糧食類。CN107478478公開了一種伏馬毒素B1基體標準物質及其制備方法，其中采用食用農產品(如玉米、小麥、大米)的培養基來培養產毒。

CN108753865公開了一種用于生產AFB1的培養基，包括一級PDA培養基和二級培養基；一級PDA培養基的制備包括：土豆削皮切丁，每195-205g土豆加入495-505ml水，煮沸、過濾，加入15-25g蔗糖，加水至1L，121℃高溫滅菌20min；二級培養基包括：玉米粉975-985g、雞蛋175-185g、酵母粉10-20g、蛋白胨30-40g、蔗糖180-190g、玉米漿575-585g、氯化鈉3-7g、花生餅粉75-85g、水575-585g。

比較目前現有的真菌培養和毒素生產的工藝，主要有以下幾種方法及不足之處：采用單一固體培養基如玉米、大米等為原料進行真菌培養，不足之處是真菌生長空間有限，營養成分來源單一，不易調控；利用混配液體培養基培養，缺點是產毒率低；利用混配固體培養基培養，缺點是培養基配制復雜，滅菌后的培養基容易粘結，操作不便，同時也不利于真菌生長。

發明內容