[發(fā)明專利]肺結(jié)核病變活動性標志物、試劑盒、方法及模型構建方法

在審

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• 申請日: 2021-04-30
• 公開（公告）號: CN113178263A
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發(fā)明（設計）人: 宋言崢;張舒林;溫子祿;黃家穎;馬輝;王琳;吳立偉
• 申請（專利權）人: 上海市公共衛(wèi)生臨床中心
• 主分類號: G16H50/50
• 分類號: G16H50/50;G16B20/00;G16B30/00
• 代理公司: 上海凱瑪頓知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 31359
• 代理人: 胡薇

本發(fā)明涉及肺結(jié)核病變活動性標志物、試劑盒、方法及模型構建方法，其特征在于，肺結(jié)核病變活動性標志物為血液樣本中的血漿蛋白生物標志物，血漿蛋白生物標志物為包括C1QB蛋白質(zhì)和CCL19(MIP3B)蛋白質(zhì)的一種或多種的聯(lián)合標志物；發(fā)明首次采用C1QB和CCL19(MIP3B)這一組合聯(lián)合標志物作為肺結(jié)核病變活動性檢測的生物標記物，構建了肺結(jié)核病變活動性檢測的快速診斷模型，為結(jié)核病的臨床診斷提供了新的方向，作為肺結(jié)核病變活動性診斷的一種技術構思，為活動性肺結(jié)核的診斷提供新的靶點；因此，本發(fā)明克服了現(xiàn)有活動性肺結(jié)核的診斷檢出率低、耗時長等缺點，具有特異性好、靈敏度高的特點，對肺結(jié)核病變活動性的輔助診斷有良好的臨床應用價值。

技術領域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學技術領域，更具體地，涉及C1QB和CCL19(MIP3B)作為肺結(jié)核病變活動性診斷標志物、試劑盒、檢測方法以及模型構建方法。

背景技術

在全球，結(jié)核病是十大死亡原因之一，也是單一傳染源的主要死因。肺結(jié)核是由結(jié)核分枝桿菌感染引起的一種慢性傳染性疾病。2019年，全世界估計有1000萬人患有結(jié)核病。結(jié)核病的診斷試驗包括痰涂片顯微鏡檢查(100多年前開發(fā))、快速分子試驗(2010年WHO首次批準)和基于培養(yǎng)的方法，痰涂片檢查只在約50-60％的肺結(jié)核患者中發(fā)現(xiàn)抗酸桿菌，而培養(yǎng)則需要長達8周才能提供結(jié)果，但二者仍是參考金標準。如果診斷不明確，未能進行及時有效的抗結(jié)核治療，結(jié)核病的死亡率會很高。

WHO，2020年全球結(jié)核病報告顯示，菌陰性肺結(jié)核患者與菌陽性肺結(jié)核患者的相對傳播率為22％，而中國至少有30％的結(jié)核病病例是由痰涂片陰性結(jié)核病傳播的。據(jù)日本的研究顯示，術前培養(yǎng)陰性的患者中有73％在其病灶中檢測不到活的結(jié)核分枝桿菌。部分結(jié)核患者包括菌陰性結(jié)核病抗結(jié)核治療結(jié)束后，肺部仍有持續(xù)性炎癥。這些炎性反應不僅對肺結(jié)核感染控制無效，反而會加劇疾病，引起結(jié)核病復發(fā)和傳染。18-氟代脫氧葡萄糖(fluorine-18fluorodeoxyglucose，18F-FDG)攝取反映細胞內(nèi)糖酵解，在結(jié)核、其他肉芽腫炎癥、腫瘤細胞中均增高。18F-FDG高攝取與疾病活動程度有較高的相關性。目前可用18F-FDG PET/CT評價菌陰性肺結(jié)核的病變活動性。然而，18F-FDG-PET/CT成本高并且涉及輻射暴露，而且對于定性病變診斷常常缺乏特異性，常常不能可靠地區(qū)分結(jié)核病變與惡性腫瘤。因此，尋找一種可替代PET-CT的生物標志物來評估肺結(jié)核病灶活動性非常重要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術問題是克服現(xiàn)有的肺結(jié)核病變活動性診斷標志物特異性不好，靈敏度不高，且檢測耗時的問題，提供C1QB和CCL19(MIP3B)這一組合作為肺結(jié)核病變活動性診斷的一種技術構思，為活動性肺結(jié)核的診斷提供新的靶點，并且對活動性肺結(jié)核診斷有良好的臨床應用價值。

具體地，本發(fā)明一方面提供了選擇性地檢測一種C1QB和CCL19(MIP3B)的試劑組合標志物在制備快速診斷肺結(jié)核病變活動性的試劑盒中的用途，所述試劑用于測定得自所述受試者的血漿中C1QB和CCL19(MIP3B)的水平，其中所述C1QB的水平相對于正常人受試者的水平的升高，CCL19(MIP3B)的水平相對于正常人受試者的水平的降低指示所述受試者中存在活動性肺結(jié)核。

一種肺結(jié)核病變活動性標志物，其特征在于，為血液樣本中的血漿蛋白生物標志物，所述血漿蛋白生物標志物為包括C1QB蛋白質(zhì)、CCL19蛋白質(zhì)或MIP3B蛋白質(zhì)的一種或多種的聯(lián)合標志物。

進一步地，所述聯(lián)合標志物中CCL19蛋白質(zhì)或MIP3B蛋白質(zhì)的氨基酸序列如SEQ IDNO:2所示，核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

進一步地，所述聯(lián)合標志物中C1QB蛋白質(zhì)的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示，核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。