[發明專利]一種羅丹明B膠體金檢測試紙條及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202110484096.3
• 申請日: 2021-04-30
• 公開（公告）號: CN113189338A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 周晉光;操薈雅;周怡君;汪真真;林絲妮;王磊
• 申請（專利權）人: 三峽大學
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/53
• 代理公司: 宜昌市三峽專利事務所 42103
• 代理人: 危松

一種羅丹明B膠體金檢測試紙條及其制備方法和應用，該試紙有一底襯、該底襯上面的中部粘貼一包被膜，該包被膜中部有一條包被羅丹明B抗原的檢測線和一條包被羊抗鼠IgG抗體的質控線，包被膜的上面左右分別粘貼一涂覆金標單克隆抗體的玻璃纖維膜和吸水紙；涂覆金標單克隆抗體的玻璃纖維膜上面粘貼一樣品墊。本發明利用現代國際最先進的膠體金免疫層析技術，提供一種農貿市場、食品生產基地、基層自測等用的檢測羅丹明B染色劑的膠體金試紙條，該試紙條具有特異性強、靈敏度高、檢測速度快等優點，且不需使用現場儀器設備，成本低廉，操作簡便，能廣泛應用于農貿市場、食品生產基地、基層及個人對于羅丹明B染色劑的檢測和食品監管部門對于羅丹明B染色劑的現場檢測和篩查。

技術領域

本發明屬于食品安全檢測領域，具體是涉及羅丹明B膠體金檢測試紙條及其制備方法和應用。

背景技術

羅丹明B（Rhodamine B）俗名叫玫瑰精、花粉紅，也叫玫瑰紅B，是一種鮮桃紅色、三苯甲烷類的堿性人工染料，是人工合成的化學物質，主要用于造紙工業、皮毛制品、纖維制品、陶瓷制品等染色，也用于制造油漆等顏料。因其價格便宜、著色強、穩定性強，已逐漸被不法商販用做替代食品染料的著色劑。近年來有關部門查出大量的玫瑰精用到食品當中的情況，從火腿、香腸、臘肉等肉產品到辣椒油、果醬等調味品及各種五顏六色的飲料。該染料具有高毒、高殘留及“三致”(致畸、致癌、致突變)等副作用。相關資料顯示，經過小鼠試驗發現，該物質可以透過皮膚，引起皮下組織肉瘤，不同程度地食入、吸入或皮膚接觸會引起頭痛、頭暈、惡心、嘔吐、腹痛、四肢酸痛、乏力等不良癥狀。由于工業染料嚴令禁止使用到食品加工中，所以國家的檢測機構在檢驗食品時，不會對這些工業染料進行檢測。由于它并非法定食品添加劑，所以沒有制定安全攝入量，監督部門也不可能對法定范圍以外的成千上百種工業原料進行常規抽查。這就讓很多黑心老板添加工業染料暫時沒有了后顧之憂。目前我國和歐盟等已禁止羅丹明B在食品中使用，但國內還沒有檢驗食品中羅丹明B的國家標準及行業標準，也沒有快速檢測與鑒定方法。傳統的儀器方法有液相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、液相色譜-質譜聯用法、電化學方法、薄層色譜法等，但這些方法操作繁瑣，且對操作者素質要求較高，不適宜現場高通量的樣品檢測。因此，這些方法在使用中受到很大的限制，而金標免疫層析法(goldimmunochromatographicas say, GICA)因其快速、操作簡便、試劑穩定、可室溫儲運的特點在近年來得到越來越多的應用。它是一種建立在免疫層析技術、單克隆抗體技術和膠體金標記技術基礎上的一種固相檢測技術，使用時只需把膠體金試紙條下端插入樣品溶液，幾分鐘就可以判斷結果。該法使用方便，不需要特殊的儀器設備，便于基層使用和現場使用；且由于為干試紙條形式，標記物穩定，在4℃貯存兩年以上，無信號衰減現象，但目前關于食品中羅丹明B的檢測未見有膠體金檢測試紙條。

發明內容

本發明的目的是提供一種羅丹明B膠體金檢測試紙條及其制備方法和應用，能夠快速有效檢測食品中羅丹明B染色劑。

一種膠體金試紙條，有一底襯、該底襯上面的中部粘貼一包被膜，該包被膜中部有一條包被羅丹明B檢測抗原的檢測線和一條包被羊抗鼠IgG抗體的控制線，包被膜的上面左右分別粘貼一涂覆金標單克隆抗體的玻璃纖維膜和吸水紙；涂覆金標單克隆抗體的玻璃纖維膜上面粘貼一樣品墊。

上述膠體金試紙條的制備方法，其特征在于先制備包被膜，將用包被緩沖液稀釋的羅丹明B檢測抗原和羊抗鼠IgG抗體稀釋，并將二者分別噴于硝酸纖維膜中部上，分別形成檢測線和質控線，再制備涂覆金標單克隆抗體的玻璃纖維膜，然后將包被摸粘貼在底襯上，在包被摸的上面左右分別粘貼一涂覆金標單克隆抗體的玻璃纖維膜和吸水紙；涂覆金標單克隆抗體的玻璃纖維膜上面粘貼一樣品墊，做成大板，切割即得膠體金試紙條。

上述膠體金試紙條在檢測羅丹明B染色劑中的應用。