[發明專利]一種定點偶聯抗體與效應分子的方法及其橋接分子

有效

• 申請號: 202110481524.7
• 申請日: 2021-04-30
• 公開（公告）號: CN113304279B
• 公開（公告）日: 2022-12-06
• 發明（設計）人: 陳韜;呂爽;岳斌;張偉
• 申請（專利權）人: 蘇州有諾真生物科技有限公司
• 主分類號: A61K47/68
• 分類號: A61K47/68;A61K47/65;A61K49/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 張立娜

1.一種用于定點偶聯抗體與效應分子的橋接分子，主要由如下兩個部分組成：

（1）抗體結合部：為修飾有活化基團的分子A；所述分子A能夠與抗體Fc段特異性結合；所述活化基團能夠使得所述分子A與抗體Fc段共價連接；

所述分子A選自如下任一：蛋白AG或蛋白AG變體；所述蛋白AG的氨基酸序列與SEQ IDNo.1編碼所得氨基酸序列相同；所述蛋白AG變體的氨基酸序列與SEQ ID No.2編碼所得氨基酸序列相同；

（2）效應分子結合部：為帶有linker的分子B；所述分子B能夠與效應分子結合；所述linker用于與所述抗體結合部中的所述分子A連接；

所述linker為GGGSENLYFQAK；用于催化所述效應分子結合部的所述linker與所述抗體結合部中的所述分子A發生連接反應的物質為Sortase A；

所述活化基團為光活性基團；

所述分子B為點擊化學基團或生物素或親和素。

2.根據權利要求1所述的橋接分子，其特征在于：所述光活性基團選自如下任一：光活性基團diazirine、光活性基團benzophenone。

3.根據權利要求1或2所述的橋接分子，其特征在于：所述橋接分子由單獨存在的所述抗體結合部和所述效應分子結合部組成。

4.根據權利要求1或2所述的橋接分子，其特征在于：所述橋接分子由所述抗體結合部和所述效應分子結合部連接而成；兩者通過所述效應分子結合部的所述linker與所述抗體結合部中的所述分子A連接。

5.一種用于定點偶聯抗體與效應分子的成套產品，包括：

P1、權利要求3所述的橋接分子；

P2、用于催化所述效應分子結合部的所述linker與所述抗體結合部中的所述分子A發生結合反應的物質，即Sortase A。

6.權利要求1-4中任一所述的橋接分子或權利要求5所述的成套產品在定點偶聯抗體與效應分子中的應用。

7.一種定點偶聯抗體與效應分子的方法，為如下方法A或方法B：

方法A：包括如下步驟：

（A1）制備權利要求1-4任一中所述的抗體結合部；

（A2）按照如下將（A1）所得抗體結合部與權利要求1-4任一中所述的效應分子結合部相連接：通過所述效應分子結合部中的所述linker與所述抗體結合部中的所述分子A連接，得到權利要求1-4任一中所述的橋接分子；

（A3）通過（A2）所得橋接分子按照如下實現待偶聯抗體和待偶聯效應分子之間的定點偶聯：依靠所述活化基團將所述橋接分子中的所述分子A與所述待偶聯抗體的Fc段共價連接，將所述橋接分子中的所述分子B與所述待偶聯效應分子共價連接或者非共價連接；

方法B：包括如下步驟：

（B1）制備權利要求1-4任一中所述的抗體結合部；

（B2）按照如下將待偶聯抗體與（B1）所得抗體結合部相連接：依靠所述活化基團將所述抗體結合部中的所述分子A與所述待偶聯抗體的Fc段共價連接，得到抗體-抗體結合部；

（B3）按照如下將（B2）所得抗體-抗體結合部與權利要求1-4任一中所述的效應分子結合部相連接：通過所述效應分子結合部中的所述linker與所述抗體結合部中的所述分子A連接，得到抗體-抗體結合部-效應分子結合部；

（B4）按照如下將（B3）所得抗體-抗體結合部-效應分子結合部與待偶聯效應分子相連接：通過所述效應分子結合部中的所述分子B實現與所述待偶聯效應分子共價連接或者非共價連接。