[發明專利]一種快速鑒定中華鱘遺傳性別的基因組序列片段ZHXF-1及其應用有效
| 申請號： | 202110477291.3 | 申請日： | 2021-04-29 |
| 公開（公告）號： | CN113136437B | 公開（公告）日： | 2022-04-08 |
| 發明（設計）人： | 胡亞成;王彬忠;杜合軍;劉雪清;肖衎;曾慶凱;張德志;吳川;管敏;張建明;郭柏福;朱欣;楊元金;姜偉;陳磊 | 申請（專利權）人： | 中國長江三峽集團有限公司中華鱘研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6888 | 分類號： | C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/12;C12N15/11 |
| 代理公司： | 宜昌市三峽專利事務所 42103 | 代理人： | 王玉芳 |
| 地址： | 443100 *** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 快速 鑒定 中華鱘 遺傳性 別的 基因組 序列 片段 zhxf 及其 應用 | ||
1.一種快速鑒定中華鱘遺傳性別的基因組序列片段ZHXF-1，其特征在于：雌性中華鱘基因組特異性片段ZHXF-1核苷酸序列為SEQ ID NO:1所示。
2.用于快速鑒定中華鱘遺傳性別的引物，其特征在于，所述的引物信息為：
引物1F：TAAAGGGAGACGGCAGAT；
引物1 R：CAGGAAAGGCAAGGATGT；
引物2F：AGAACTGAAGGTGCTCAA；
引物2R：GCCTACTGGGAAAGACG。
3.權利要求2所述的引物在中華鱘魚性別鑒定中應用。
4.一種鑒定中華鱘雌雄的試劑盒，其特征在于，包含權利要求2所述的引物對。
5.一種鑒定中華鱘雌雄的方法，其特征在于，使用權利要求2所述的引物對對待測中華鱘的基因組DNA進行PCR擴增，當擴增結果片段為529bp和317bp兩條條帶時，則待測中華鱘為雌性，當PCR擴增結果僅可擴增出317bp一條條帶時，待測中華鱘為雄性。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，提取待鑒定中華鱘DNA；利用所述引物對樣品進行PCR擴增；把PCR擴增產物在2％的瓊脂糖凝膠上進行電泳30分鐘進行分離，具體電壓為120V；根據分離結果統計PCR擴增產物的條帶大??；
PCR擴增體系是25ul：10×PCR Buffer 3ul，2.5mmol/L dNTP2ul，MgCl23ul，上下游引物各1ul，Taq酶0.5ul，DNA模板2ul，超純水10.5ul；
PCR反應程序為： 94℃預變性3min; 94℃變性30s，退火溫度復性45s，72℃延伸30s，35個循環； 72℃延伸10min； 4℃保存。
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