[發(fā)明專利]鑒定食管癌狀態(tài)的方法和試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110475393.1
• 申請日: 2021-04-29
• 公開（公告）號: CN113234821B
• 公開（公告）日: 2022-09-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳彥利;李明明;蒲玨
• 申請（專利權(quán)）人: 北京艾克倫醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京慧誠智道知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11539
• 代理人: 李楠

1.用于檢測來自受試者的生物樣品中生物標(biāo)志物基因的甲基化水平的引物對在制備用于鑒定所述受試者中食管癌狀態(tài)的試劑盒中的應(yīng)用，其中所述引物對用于以經(jīng)亞硫酸氫鹽處理的所述生物標(biāo)志物基因或其片段為模板進行PCR擴增反應(yīng)；所述生物標(biāo)志物基因為：APC、RARB、RASSF1A、SOX17和TFPI2；或者為：APC、CDH13、FHIT、P16、RARB、RASSF1A、RUNX3、SFRP1、SOX17和TFPI2，

其中用于APC甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：11和12所示或SEQ ID NO：15和16所示；

用于CDH13甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：19和20所示或SEQ ID NO：23和24所示；

用于FHIT甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：27和28所示或SEQ ID NO：31和32所示；

用于P16甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：35和36所示、SEQ ID NO：39和40所示或SEQ ID NO：43和44所示；

用于RARB甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：47和48所示、SEQ ID NO：51和52所示或SEQ ID NO：55和56所示；

用于RASSF1A甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：59和60所示或SEQ ID NO：63和64所示；

用于RUNX3甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：67和68所示、SEQ ID NO：71和72所示、或SEQ ID NO：75和76所示；

用于SFRP1甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：79和80所示或SEQ ID NO：83和84所示；

用于SOX17甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：87和88所示或SEQ ID NO：91和92所示；以及

用于TFPI2甲基化水平檢測的引物對的序列如SEQ ID NO：95和96所示或SEQ ID NO：99和100所示，

其中所述試劑盒還包括闡述所述試劑盒使用方法以及以邏輯回歸對檢測結(jié)果進行處理的說明書。

2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其中所述試劑盒還包括封閉引物，其中

與SEQ ID NO：11和12所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：13所示；

與SEQ ID NO：15和16所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：17所示；

與SEQ ID NO：19和20所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：21所示；

與SEQ ID NO：23和24所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：25所示；

與SEQ ID NO：27和28所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：29所示；

與SEQ ID NO：31和32所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：33所示；

與SEQ ID NO：35和36所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：37所示；

與SEQ ID NO：39和40所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：41所示；

與SEQ ID NO：43和44所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：45所示；

與SEQ ID NO：47和48所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：49所示；

與SEQ ID NO：51和52所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：53所示；

與SEQ ID NO：55和56所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：57所示；

與SEQ ID NO：59和60所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：61所示；

與SEQ ID NO：63和64所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：65所示；

與SEQ ID NO：67和68所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：69所示；

與SEQ ID NO：71和72所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：73所示；

與SEQ ID NO：75和76所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：77所示；

與SEQ ID NO：79和80所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：81所示；

與SEQ ID NO：83和84所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：85所示；

與SEQ ID NO：87和88所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：89所示；

與SEQ ID NO：91和92所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：93所示；

與SEQ ID NO：95和96所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：97所示；以及

與SEQ ID NO：99和100所示序列的引物對聯(lián)合使用的封閉引物的序列如SEQ ID NO：101所示，

其中所述封閉引物具有抗DNA聚合酶延伸擴增的3’末端修飾。