[發(fā)明專利]改良的干細(xì)胞組合物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110474002.4
• 申請日: 2015-04-07
• 公開（公告）號: CN113337462A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: S·伊泰斯庫;P·西蒙斯
• 申請（專利權(quán)）人: 邁索布拉斯特國際有限公司
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;A61K35/28;A61P9/10;A61P9/00;A61P7/02;A61P43/00
• 代理公司: 中國貿(mào)促會專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 11038
• 代理人: 張小勇

本公開提供了表達(dá)高水平的血管生成素?1(Ang1)的干細(xì)胞和其產(chǎn)生方法。此類干細(xì)胞可以用于一系列治療應(yīng)用。

本申請是CN201580018440.2的分案申請。

技術(shù)領(lǐng)域

本公開涉及表達(dá)高水平血管生成素-1(Ang1)的干細(xì)胞和其產(chǎn)生方法。此類干細(xì)胞可以用于一系列治療應(yīng)用，以例如促進血管形成和/或血管生成。

發(fā)明背景

血管生成素屬于血管生長因子家族，血管生長因子在胚胎和出生后血管生成中起作用。Ang1促進內(nèi)皮細(xì)胞和一些非內(nèi)皮細(xì)胞(例如平滑肌細(xì)胞)的遷移。Ang1還誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞萌發(fā)和重新組織到小管中。Ang1對內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)揮有效的消炎作用，遏制血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)誘發(fā)的E-選擇素、ICAM-1和VCAM-1上調(diào)，并抑制回應(yīng)于VEGF和TNF-α的白細(xì)胞附著和遷移(Kim等人2001a)。

許多研究已經(jīng)表明，Ang1的過度表達(dá)或補充Ang1的添加在減輕局部缺血和恢復(fù)包括四肢、腦部、關(guān)節(jié)、腎和最顯著地心臟在內(nèi)的若干器官的功能方面具有有益的作用。其它有益的作用包括減輕血栓(Kim等人2001b)。因此，Ang1展現(xiàn)出大量將暗示其用作心血管疾病治療劑的效用的重要特性。

在功能性血管系統(tǒng)的發(fā)育所需的生長因子級聯(lián)中，Ang1和VEGF發(fā)揮重要作用。因此，對于缺血性心肌治療中的治療性血管形成，Ang1與VEGF組合使用也被視為一種非常有希望的候選療法。

以前，Ang1與VEGF-A組合施用到測試動物中的心肌梗塞或周圍梗塞區(qū)域中顯示增加新血管形成并減少心肌細(xì)胞凋亡，引起注射部位的心肌細(xì)胞再生增加，而且改善血管灌注和心臟功能。次最大劑量的約20:1比率的Ang1和VEGF加強這些作用，并比單獨任一因子更有效(Chae等人2000)。這些結(jié)果表明Ang1與VEGF組合治療可以用于產(chǎn)生治療性血管形成。

近來，干細(xì)胞療法已經(jīng)顯現(xiàn)為缺血性心臟病的潛在治療之一(Huang等人2011；Lijie等人2007)。

由于在許多類型的干細(xì)胞中血管生成因子的表達(dá)不足，所以單獨干細(xì)胞用于促進血管生成仍然受限。涉及用編碼Ang1的核酸分子轉(zhuǎn)染干細(xì)胞的干細(xì)胞遺傳修飾已經(jīng)用以解決此限制。然而，由于技術(shù)復(fù)雜且遺傳修飾過程引起可能不合需要的作用，所以使用經(jīng)遺傳修飾的干細(xì)胞具有其缺點。

發(fā)明概要

本公開是基于表達(dá)高水平Ang1的干細(xì)胞群體的意外產(chǎn)生，不需要用表達(dá)Ang1的核酸轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個實例中，此干細(xì)胞群體還表達(dá)低水平VEGF，且所產(chǎn)生的Ang1:VEGF的比率與Chae等人(2000)所示的特別有效地加強血管形成的比率一致。

因此，本公開提供了一種組合物，其包含未遺傳修飾的干細(xì)胞，其中所述未遺傳修飾的干細(xì)胞表達(dá)至少0.1μg/10⁶個細(xì)胞的量的Ang1。

在另一實例中，組合物包含表達(dá)至少0.5μg/10⁶個細(xì)胞的量的Ang1的干細(xì)胞。在另一實例中，干細(xì)胞表達(dá)至少0.7μg/10⁶個細(xì)胞的量的Ang1。在另一實例中，干細(xì)胞表達(dá)至少1μg/10⁶個細(xì)胞的量的Ang1。

在另一實例中，干細(xì)胞表達(dá)少于約0.05μg/10⁶個細(xì)胞的量的VEGF。在另一實例中，干細(xì)胞表達(dá)少于約0.03μg/10⁶個細(xì)胞的量的VEGF。在另一實例中，干細(xì)胞表達(dá)少于約0.02μg/10⁶個細(xì)胞的量的VEGF。