[發(fā)明專利]微納生物顆粒熱泳檢測裝置及方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110473040.8
• 申請日: 2021-04-29
• 公開（公告）號: CN113188959A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫佳姝;鄧瑾琦;劉超;田飛;趙帥
• 申請（專利權(quán)）人: 國家納米科學(xué)中心
• 主分類號: G01N15/00
• 分類號: G01N15/00
• 代理公司: 北京市英智偉誠知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11521
• 代理人: 劉丹妮;姚望舒

1.一種微納生物顆粒熱泳檢測裝置，其特征在于，所述裝置包括芯片和熱泳體系；

其中，所述芯片包括自下而上依次設(shè)置的載玻片、微腔和藍(lán)寶石片。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測裝置，其特征在于，所述芯片的微腔為圓柱形微腔；

優(yōu)選地，所述圓柱形微腔的直徑為2～2000mm，優(yōu)選為10～200mm，最優(yōu)選為70mm；和/或

所述圓柱形微腔高度為10～200μm，優(yōu)選為50～120μm，最優(yōu)選為80μm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的檢測裝置，其特征在于，所述熱泳體系包括熒光顯微鏡、激光器和EMCCD。

4.一種微納生物顆粒熱泳檢測方法，其特征在于，所述方法包括使用權(quán)利要求1至3中任一項所述的微納生物顆粒熱泳檢測裝置進(jìn)行檢測；

優(yōu)選地，所述微納生物顆粒選自以下一種或多種：病毒、細(xì)菌、細(xì)胞外囊泡、脂蛋白。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)將微納生物顆粒與熒光標(biāo)記物混合，得到熒光標(biāo)記的微納生物顆粒；優(yōu)選地，所述微納生物顆粒與熒光標(biāo)記物混合后進(jìn)一步包括孵育步驟；

(2)將步驟(1)中得到的熒光標(biāo)記的微納生物顆粒與PEG溶液混合得到待測溶液；

(3)將步驟(2)得到的待測溶液加入所述微納生物顆粒熱泳檢測裝置芯片的微腔內(nèi)，蓋上藍(lán)寶石片，放置在熒光顯微鏡的載物臺上；

(4)打開激光器照射芯片，匯聚微納生物顆粒，匯聚前后使用EMCCD拍攝；

(5)計算匯聚前后的熒光強(qiáng)度值之差，得到微納生物顆粒匯聚所得熒光強(qiáng)度值。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述熒光標(biāo)記物選自以下一種或多種：小分子熒光染料、熒光核酸適體、熒光標(biāo)記抗體；

優(yōu)選地，所述小分子熒光染料為DiI。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述待測溶液中PEG的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為6％以上，優(yōu)選為6％～12％，最優(yōu)選為9％。

8.根據(jù)權(quán)利要求5至7中任一項所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，所述激光照射波長為1000～100000nm，優(yōu)選為1200～20000nm，最優(yōu)選為1480nm。

9.根據(jù)權(quán)利要求5至8中任一項所述的方法，其特征在于，步驟(4)中，熒光顯微鏡的物鏡的放大倍數(shù)為5～100倍；

EMCCD的曝光時間為2～1000ms；和/或

EMCCD的增益為10～100。

10.一種微納生物顆粒檢測系統(tǒng)，其特征在于，所述微納生物顆粒檢測系統(tǒng)包括權(quán)利要求1至3中任一項所述的微納生物顆粒熱泳檢測裝置。