[發明專利]基于細胞外基質材料制備的雙層人工真皮及其制備方法

在審

• 申請號: 202110472933.0
• 申請日: 2021-04-29
• 公開（公告）號: CN113144295A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 樊李紅;郭遠東;劉爽;魏浩杰;孫慧譞;寧校慶
• 申請（專利權）人: 武漢理工大學
• 主分類號: A61L27/60
• 分類號: A61L27/60;A61L27/18;A61L27/36;A61L27/20;A61L27/54;A61L27/58;C08J5/18;C08L75/06;A61F2/10
• 代理公司: 武漢開元知識產權代理有限公司 42104
• 代理人: 胡鎮西;張繼東

1.一種基于細胞外基質材料制備的雙層人工真皮，其特征在于：包括粘合在一起的聚氨酯外膜和脫細胞外基質，所述聚氨酯外膜通過聚酯多元醇和異氰酸酯制備，所述脫細胞外基質通過哺乳動物跟腱制備。

2.一種如權利要求1所述基于細胞外基質材料制備的雙層人工真皮的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

A)聚氨酯外膜的制備：

將3wt％～5wt％的聚酯多元醇、1wt％～3wt％的異氰酸酯和0.1wt％～0.3wt％的擴鏈劑在氮氣保護下攪拌3h～5h制得聚氨酯預聚體，將聚氨酯預聚體加入高速分散機中，在2000rpm～5000rpm的轉速下進行氮氣保護攪拌，攪拌10s～30s后加入催化劑，繼續攪拌50s～70s，再加入二甲基亞砜溶解后，倒在聚四氟乙烯板上，在55℃～65℃的溫度下烘干后脫模成膜，制得聚氨酯外膜；

B)脫細胞外基質的制備：包括如下步驟

B1)取15g的哺乳動物跟腱，使用1wt％～5wt％的十二烷基磺酸鈉和0.5wt％～2wt％的聚氧乙烯-8-辛基苯基醚處理24h～72h，再用去離子水清洗4～8次，得到處理后的哺乳動物跟腱組織；

B2)使用1wt％～2wt％的醋酸溶液對哺乳動物跟腱組織處理24h～72h，完成后使用去離子水清洗4～8次；

B3)利用液氮和PBS溶液對所述步驟B2)處理后的哺乳動物跟腱組織進行凍-融處理：先使用液氮將哺乳動物跟腱組織凍結20～40分鐘，再利用PBS溶液浸泡融化，并浸泡攪拌24h～72h，最后使用去離子水清洗4～8次；

B4)將所述步驟B3)處理后的哺乳動物跟腱組織加入300ml～500ml的水，通過2000rpm～5000rpm的機械攪拌得到均一的粘稠狀流體，將粘稠狀流體通過注射器注射到模具中，并在模具中加入0.5g～1.5g促進皮膚生長活性高分子，得到細胞外基質-生長活性高分子混合液，然后在-60℃～-100℃的溫度下冷凍24～72h，凍干后脫模后放入冷凍干燥機中冷凍干燥36～48h，得到直徑8～12cm的絮狀圓柱體材料，即制得脫細胞外基質；

C)將所述步驟A)制備好的聚氨酯外膜與所述步驟B)制備好的脫細胞外基質進行粘合，制得雙層人工真皮材料。

3.如權利要求2所述基于細胞外基質材料制備的雙層人工真皮的制備方法，其特征在于：將制得的雙層人工真皮材料裝入鋁箔袋中進行包裝，然后進行輻照滅菌。

4.如權利要求2所述基于細胞外基質材料制備的雙層人工真皮的制備方法，其特征在于：所述哺乳動物跟腱為豬跟腱、牛跟腱、羊跟腱或狗跟腱。

5.如權利要求2所述基于細胞外基質材料制備的雙層人工真皮的制備方法，其特征在于：所述步驟B4)中的促進皮膚生長活性高分子為殼聚糖、海藻酸鈉、硫酸軟骨素、透明質酸或肝素鈉。

6.如權利要求2所述基于細胞外基質材料制備的雙層人工真皮的制備方法，其特征在于：所述步驟A)中的擴鏈劑為1，4丁二醇。

7.如權利要求2所述基于細胞外基質材料制備的雙層人工真皮的制備方法，其特征在于：所述步驟A)中的催化劑為胺類催化劑。