[發明專利]一種香蕉種質資源離體增殖的保存方法

有效

• 申請號: 202110470164.0
• 申請日: 2021-04-29
• 公開（公告）號: CN113142055B
• 公開（公告）日: 2022-10-28
• 發明（設計）人: 石云平;許娟;蘇祖祥;李小泉
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 楊雪梅

本發明公開了一種香蕉種質資源離體增殖的保存方法，該方法在室溫18～32℃條件下，應用多種植物生長調節劑不同濃度組合配制出的離體保存培養基，讓香蕉吸芽或叢生芽在培養基中緩慢增殖生長，芽壯，每個轉接周期的時間長，最長達17個月。該方法不僅節省了轉接所需的材料費、人工費，還節省了培養室內空調的電費等，且保存的香蕉種質資源因不受低溫及抑制劑或延緩劑的影響，長勢好，離體培養結束后，種苗在大田種植中農藝性狀穩定，可正常開花結果。本發明方法具有操作簡單、成本低等優點，是一種安全高效的香蕉種質資源離體保存的方式。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體是一種香蕉種質資源離體增殖的保存方法。

背景技術

香蕉是世界上主要水果作物和重要糧食作物之一，也是中國最重要的熱帶、亞熱帶水果。香蕉種植歷史悠久，但產業發展中存在栽培品種單一化以及病蟲害、冷害等生物和非生物逆境脅迫等問題，應用種質創新出諸多抗逆性強的新品系，豐富香蕉種質資源，是解決產業問題的有效途徑。種質資源作為香蕉科技創新和現代種業發展的物質基礎，收集、保存及利用好種質資源，對于香蕉產業發展尤為重要。

一般作物的種質資源保存分為種子、田間和離體培養三種保存方式。香蕉種質資源長期有效保存的方法探索：首先，種子保存不適用于香蕉種質資源，因為用于生產的香蕉品種為三倍體，一般不產生種子，以無性繁殖方式繁育種苗；其次，田間保存占用大量的土地和勞動力，成本高，且易受外界不利因素影響，造成香蕉種質資源流失；第三，離體培養保存常用于香蕉種質資源保存，培養條件可控，占用面積小，還可避免田間諸多不利因素，但由于香蕉的繼代培養周期時間短，僅為20天左右，頻繁轉接，易造成培養苗的代數過高，增加了種質資源變異的幾率。

目前，香蕉種質資源離體培養保存，常以抑制組培苗生長來達到較長時間保存的目的，以低溫與生長抑制劑或延緩劑結合的方法最為常用。然而香蕉屬于熱帶作物，對低溫敏感，易受到冷害。因此，香蕉組培苗在低溫加抑制劑或延緩劑環境影響下長時間的培養保存，芽的基部褐化變黑現象嚴重，生長點易受傷害，基本無增殖，長勢差，電費成本較高；且香蕉種質資源在結束離體保存時還能否正常生根與大田生長也都是值得關注的問題。

發明內容

針對上述香蕉種質資源離體培養保存中存在的問題，本發明提供一種香蕉種質資源離體增殖的保存方法，該方法在室溫條件下（18～32℃），應用多種植物生長調節劑不同濃度組合配制出的離體保存培養基，讓香蕉吸芽或叢生芽在培養基中緩慢增殖生長，芽壯，每個轉接周期的時間長，最長達17個月。該方法不僅節省了轉接所需的材料費、人工費，還節省了培養室內空調的電費等，且保存的香蕉種質資源因不受低溫及抑制劑或延緩劑的影響，長勢好，離體培養結束后，種苗在大田種植中農藝性狀穩定，可正常開花結果。

實現本發明目的的技術方案是：

一種香蕉種質資源離體增殖的保存方法，包括以下步驟：

（1）外植體處理及叢生芽誘導：

取無病蟲害且健壯的香蕉吸芽，用刀削去外層，留最大處直徑為10 cm的吸芽，將吸芽外表噴灑75%酒精滅菌后，在超凈工作臺上，再用刀將香蕉吸芽外層削去，剝成最大處直徑2 cm的嫩小吸芽，切去頂部1/3，剩下的吸芽平均切分成兩半，接入叢生芽誘導培養基中培養；3個月時，吸芽生長點處長出1個小芽；6個月時，芽長大，基部開始長出小芽，17個月時形成叢生芽；

所述叢生芽誘導培養基為：MS+蕓苔素內酯0.1 mg/L+ 6-BA 0.3 mg/L + TDZ 0.2mg/L+ZT 0.2 mg/L + 2,4-D 0.5 mg/L +蔗糖30 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為6.0；

（2）叢生芽離體保存培養：