[發明專利]重組釀酒酵母菌株及其發酵方法

在審

• 申請號: 202110466187.4
• 申請日: 2021-04-28
• 公開（公告）號: CN113174399A
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發明（設計）人: 元英進;吳楠;杜現禮;王穎;姚明東;段小濤;肖文海
• 申請（專利權）人: 天津大學;中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N15/54;C12N1/19;C12P17/18;C12R1/865
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 張柳

1.輔因子調節酶在合成田麥角堿、麥角生物堿和/或藥物中的應用；

所述麥角生物堿包括麥角酸衍生物；

所述藥物包括麥角酸衍生物；

所述輔因子調節酶包括UTR1，MAE1，POS5或PYC2中的一種或多種的組合酶。

2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，經UTR1，POS5，MAE1或PYC2中的一種或兩者以上的組合酶調節內源輔因子平衡。

3.表達盒，其特征在于，在功能表達盒WN414中插入UTR1，MAE1，POS5或PYC2中的一種或多種。

4.如權利要求3所述的表達盒，其特征在于，所述插入的位置包括Pgal1-TDH1t之間。

5.質粒，其特征在于，轉化有如權利要求3或4所述的表達盒。

6.菌株，其特征在于，轉化有如權利要求5所述的質粒。

7.如權利要求6所述的菌株，其特征在于，其包括第一表達模塊、第二表達模塊、第三表達模塊和/或內源模塊；

所述第一表達模塊包括dmaW-easF；所述第一表達模塊的整合位點包括XV染色體的Δ22位點；和/或

所述第二表達模塊包括easE-easC；所述第二表達模塊的整合位點包括XVI染色體的Δ15位點；和/或

所述內源模塊包括ero1-fad1；所述內源模塊的整合位點包括VIII染色體的Δ14位點；和/或

所述第三表達模塊包括：

來源于C.fusiformis、Claviceps purpurea或N.lolii的easA；和/或

來源于Claviceps purpurea、Aspergillus fumigatus或N.lolii的easG；和/或

來源于Claviceps purpurea或Aspergillus fumigatus的easD；

其中，來源于Claviceps purpurea或Aspergillus fumigatus的easD的整合位點包括GAL1/7/10。

8.添加前體底物和/或甲基供體在合成田麥角堿、麥角生物堿和/或藥物中的應用；

所述麥角生物堿包括麥角酸衍生物；

所述藥物包括麥角酸衍生物；

所述前體底物包括色氨酸；和/或

所述甲基供體包括SAM。

9.培養基，其特征在于，包括前體底物和/或甲基供體；

所述前體底物包括色氨酸；和/或

所述甲基供體包括SAM。

10.合成田麥角堿、麥角生物堿和/或藥物的方法，其特征在于，取如權利要求6或7所述的菌株，經如權利要求9所述的培養基培養，獲得田麥角堿；取所述田麥角堿制備獲得麥角生物堿和/或藥物；所述麥角生物堿包括麥角酸衍生物；所述藥物包括麥角酸衍生物。