[發明專利]一種測定羅紅霉素對小麥發芽影響的方法

在審

• 申請號: 202110462801.X
• 申請日: 2021-04-28
• 公開（公告）號: CN113170625A
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發明（設計）人: 龔鎮洪;余彬彬;呂磊;張天瑩;錢曉晴
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: A01C1/00
• 分類號: A01C1/00;A01G31/00;A01G7/06;C05G1/00;C05G5/20
• 代理公司: 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222
• 代理人: 沈志海

一種測定羅紅霉素對小麥發芽影響的方法，屬于生態毒理學技術領域，包括配制營養液、配制不同濃度梯度的羅紅霉素、測定小麥種子萌發狀況、測定小麥幼苗生物量這幾個步驟。通過觀察不同羅紅霉素濃度下三種小麥萌發的狀況，可以較為系統地觀察逆境脅迫對種子萌發的影響。為評價抗生素污染的生態影響提供科學依據，同時為選育不同基因型小麥以及含抗生素沼液的合理使用提供了理論支持，保證了農產品安全。

技術領域

本發明屬于生態毒理學技術領域，涉及一種測定羅紅霉素對小麥發芽影響的方法，具體的說誰涉及一種可用于測定抗生素殘留對小麥種子萌發的影響，為生產應用提供科學依據的測定方法。

背景技術

小麥是中國主要糧食作物之一，種植面積廣泛，在種植過程中常常使用有機肥促進其生長發育，同時也是土壤污染生態毒理診斷重要的模式生物，更有研究發現高等植物中小麥早期生長對土壤有機污染的響應非常敏感。已有的研究發現，抗生素對植物發芽期影響不大，但對植物萌發過程有一定影響，表現為低濃度時促進和高濃度時抑制。種子萌發和幼苗的形態建成是作物生長的關鍵時期，也是植物對外界環境因子最敏感的重要階段之一。目前，研究的抗生素主要集中在四環素類、磺胺類和喹諾酮類，大環內酯類抗生素對植物種子萌發的影響研究較少。

發明內容

本發明的目的是目前對抗生素影響植物種子萌發方面的研究較少，不利于作物生長等不足，提出一種測定羅紅霉素對小麥發芽影響的方法，通過測定在不同濃度下三種小麥種子發芽率以及根長芽長抑制率和小麥幼苗生物量，明確不同濃度羅紅霉素對不同種小麥生長發育的影響，為評估抗生素對小麥等作物的生態影響提供了新的方法。

本發明的技術方案：一種測定羅紅霉素對小麥發芽影響的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)配制營養液：Ca(NO₃)₂·4H₂O 1mM、KNO₃ 1.25mM、NH₄NO₃ 0.25mM、KH₂PO₄ 0.25mM、MgSO₄·7H₂O 0.5 mM、Fe-EDTA 0.125 mM、KI 6.25×10^-6 mM、HBO₃ 1.25×10^-4 mM、MnSO₄ 1.85×10^-4 mM、ZnSO₄ 1.25×10^-5 mM、Na₂MoO₄ 2.5×10^-7 mM、CuSO₄ 4×10^-8 mM、CoCl₂·6H₂O 2.5×10^-8 mM；

(2)配制羅紅霉素溶液：設置大環內酯類抗生素羅紅霉素，濃度梯度為0、0.1、0.5、1、5、10 mg·L^-1，分別用營養液定容；

(3)小麥種子消毒后，一部分添加羅紅霉素溶液用于測定發芽率，其余使用去離子水對小麥種子進行催芽；

(4)選取一部分催芽1天后露白的小麥種子放入培養皿，添加羅紅霉素溶液進行培養，4天后測定羅紅霉素對小麥種子的根長以及芽長的影響，其余小麥種子繼續使用去離子水培養；

(5)將配制羅紅霉素溶液倒入水培盒中，將去離子水培養3天后發芽出根的小麥種子根系插進水培盒中并固定小麥種子，水培盒放入光照培養箱中連續培養8天；

(6)測定小麥幼苗的生長發育情況：培養小麥8天后測定小麥幼苗的鮮重、干重、地上部長度、地下部長度，確定小麥幼苗生物量大小。