[發(fā)明專利]一組檢測(cè)生脈注射液質(zhì)量的血清蛋白標(biāo)志物及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110461175.2
• 申請(qǐng)日: 2021-04-27
• 公開（公告）號(hào): CN113189346A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 詹淑玉;張小平;丁寶月;張潔;姬翔宇;魏真真;劉國強(qiáng);呂曉慶;鄭永霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 嘉興學(xué)院;嘉興市第一醫(yī)院
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N30/88;C07K1/34
• 代理公司: 北京東方盛凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11562
• 代理人: 張雪

本發(fā)明公開了一組檢測(cè)生脈注射液質(zhì)量的血清蛋白標(biāo)志物及其應(yīng)用，屬于中藥領(lǐng)域。本發(fā)明利用血清蛋白質(zhì)組學(xué)方法，篩選得到了一組受異丙腎上腺素(ISO)誘導(dǎo)的心肌缺血調(diào)控，同時(shí)生脈注射液干預(yù)對(duì)其具有回調(diào)作用的蛋白，并選擇了其中的三個(gè)蛋白進(jìn)行了PRM驗(yàn)證，結(jié)果也驗(yàn)證了所述蛋白質(zhì)作為生脈注射液質(zhì)量標(biāo)志物的可靠性。本發(fā)明還提供了一種有效的用于生脈注射液質(zhì)量評(píng)價(jià)的血清標(biāo)志物篩選方法，此方法能夠有效的篩選血清中生脈注射液的標(biāo)志物，為進(jìn)一步篩選更多生脈注射液藥效學(xué)指標(biāo)奠定了基礎(chǔ)。本發(fā)明公開的標(biāo)志物同時(shí)能夠作為心肌缺血的診斷標(biāo)志物，并且在生脈注射液質(zhì)量評(píng)價(jià)和藥效學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，特別是涉及一組檢測(cè)生脈注射液質(zhì)量的血清蛋白標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

中藥復(fù)方注射劑在臨床上應(yīng)用廣泛、作用確切，但是其安全性一直是備受關(guān)注的問題。體內(nèi)過程研究包括藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)以及藥動(dòng)學(xué)-藥效學(xué)結(jié)合研究有助于指導(dǎo)中藥復(fù)方的臨床合理用藥，對(duì)于保障中藥復(fù)方的有效性和安全性具有重要意義。目前，隨著分析技術(shù)的進(jìn)步，中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究已經(jīng)取得了很大進(jìn)展。但是，中藥藥效學(xué)由于缺乏明確、易獲取的藥效指標(biāo)，其研究仍然面臨許多問題和挑戰(zhàn)。對(duì)于復(fù)方制劑來說，藥物的組分配比是影響藥物效果的關(guān)鍵。目前在復(fù)方藥物的配比優(yōu)化研究中，常常通過給藥后的整體治療效果來評(píng)價(jià)藥物配方，但其存在檢測(cè)指標(biāo)過多、精確度較低的問題。

生脈注射液是由紅參、麥冬、五味子三味中藥組成的復(fù)方制劑，在臨床上廣泛用于治療心肌梗塞、心源性休克、感染性休克等癥。目前對(duì)于生脈注射液質(zhì)量和藥效標(biāo)志物的研究多集中于心肌組織，但其樣本的獲取困難，不能做到實(shí)時(shí)監(jiān)控，且取樣時(shí)需要處死小鼠，增加大量實(shí)驗(yàn)成本。

血清蛋白質(zhì)組學(xué)(serum proteomics)是生命科學(xué)研究領(lǐng)域一門新興而發(fā)展迅速的學(xué)科，其采取系統(tǒng)的、全方位的研究模式，從整體、動(dòng)態(tài)、網(wǎng)絡(luò)的水平上對(duì)與疾病相關(guān)和藥物作用下的所有血清蛋白質(zhì)進(jìn)行研究。血液中含有豐富的蛋白質(zhì)，特別是包含了來源于許多機(jī)體組織的蛋白質(zhì)子集，血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究可以提供比研究單一組織或器官更加廣泛的蛋白質(zhì)種類和數(shù)量。因此，血清蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)已經(jīng)成為研究抗腫瘤以及抗心血管系統(tǒng)疾病機(jī)制及靶點(diǎn)篩選的有力工具。但目前尚未有通過血清蛋白質(zhì)組學(xué)研究生脈注射液質(zhì)量鑒定標(biāo)志物的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一組檢測(cè)生脈注射液質(zhì)量的血清蛋白標(biāo)志物及其應(yīng)用，以解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，為生脈注射液的質(zhì)量控制和藥效學(xué)研究提供有用的工具。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下方案：

技術(shù)方案之一，一組檢測(cè)生脈注射液質(zhì)量的心肌缺血生物標(biāo)志物，所述的生物標(biāo)志物包括ProteinID分別為D4AA05、Q4KM73、M0R5J4、M0R590、Q5M871或D3ZJW6的蛋白質(zhì)中的一種或多種。

在一些優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述的生物標(biāo)志物包括ProteinID分別為M0R590、Q5M871、M0R5J4的蛋白質(zhì)中的一種或多種。

技術(shù)方案之二，提供了檢測(cè)所述的生物標(biāo)志物的試劑在制備診斷心肌缺血的制劑中的應(yīng)用。

技術(shù)方案之三，提供了檢測(cè)所述的生物標(biāo)志物的試劑在生脈注射液藥效學(xué)研究中的應(yīng)用。

技術(shù)方案之四，提供了檢測(cè)所述的生物標(biāo)志物的試劑在制備評(píng)價(jià)生脈注射液質(zhì)量的試劑中的應(yīng)用。

技術(shù)方案之五，提供了一種檢測(cè)試劑盒，所述的試劑盒中包括檢測(cè)所述的生物標(biāo)志物的試劑。

技術(shù)方案之六，提供了一種生脈注射液質(zhì)量評(píng)價(jià)血清生物標(biāo)志物的篩選方法，所述方法包括以下步驟：

(1)樣品提取：取生脈組注射生脈注射液的心肌缺血大鼠、模型組未注射生脈注射液的心肌缺血大鼠和對(duì)照組普通大鼠血清樣本，去除高豐度蛋白質(zhì)，得到低豐度組分溶液；超濾濃縮，加入裂解液，離心，取上清；采用BCA法進(jìn)行蛋白質(zhì)定量；