[發明專利]一種數字微流控自身免疫抗體多重檢測系統

在審

• 申請號: 202110460449.6
• 申請日: 2021-04-27
• 公開（公告）號: CN113181981A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 蘇陽;張研
• 申請（專利權）人: 江蘇液滴邏輯生物技術有限公司
• 主分類號: B01L3/00
• 分類號: B01L3/00;G01N33/53;G01N33/564;G01N33/58
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種數字微流控自身免疫抗體檢測芯片，其包含上蓋(1)、固定抗原(2)、導電層(3)、疏水層(4)、介電層(5)、基底(6)和電極(7)、試劑及樣本分配區(8)、廢液區(9)、樣本溶液(10)、清洗液(11)、含熒光標記的二抗溶液(12)；

其中，所述固定抗原(2)是將抗原按約定體積注射至上蓋1的下表面，經過風干實現抗原固定的，所述下表面為面向電極的一面。

2.根據權利要求1所述的數字微流控自身免疫抗體檢測芯片，其特征在于，所述固定抗原(2)為n個，n為≥1的正整數；

優選地，所述芯片包含m種含熒光標記的二抗溶液，m為≥1的正整數。

3.根據權利要求2所述的數字微流控自身免疫抗體檢測芯片，其特征在于，所述芯片裝載于檢測設備之上并使所述芯片內充滿生物兼容性介質油；

優選地，所述樣本為全血、血清、血漿；

優選地，所述抗原通過機械臂注射至上蓋(1)的下表面；

優選地，樣本和/或試劑可以采用移液槍注射的方式、獨立試劑包加載的方式或試劑在芯片中預埋的方式實現加載；

優選地，所述芯片可以包含多個不同形狀尺寸的電極(7)。

4.一種數字微流控自身免疫抗體多重檢測系統，其特征在于，所述系統包括權利要求1-3中任一項所述的數字微流控自身免疫抗體檢測芯片。

5.根據權利要求4所述的數字微流控自身免疫抗體多重檢測系統，其特征在于，所述系統還包括熒光檢測模塊，以實現定性或定量檢測；

優選地，所述系統還包括電極設計或所述芯片的多個級聯，以實現更高檢測通量。

6.一種利用權利要求1-3中任一項所述的芯片或權利要求4或5中任一項所述的系統進行數字微流控自身免疫抗體多重檢測的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)將芯片裝載于檢測設備之上并使芯片內充滿生物兼容性介質油，在對應入口按規定體積加載樣本及試劑；

(2)將樣本(10)定量分配為n個樣本液滴(13)并分別轉移至n個固定抗原所在位置，進行孵育反應，孵育反應完成后將樣本液滴(13)轉移至廢液區(9)丟棄；

(3)將清洗液(11)分配出n滴清洗液液滴(14)，對固定抗原進行清洗，清洗完成后將清洗液液滴(14)轉移至廢液區(9)丟棄；

(4)將含熒光標記的二抗溶液定量分配為n個樣本液滴(15)并分別轉移至n個固定抗原所在位置，進行孵育反應，孵育反應完成后將樣本液滴(15)轉移至廢液區(9)丟棄；

(5)將清洗液(11)分配出n滴清洗液液滴(14)，對固定抗原進行清洗，清洗完成后將清洗液液滴(14)轉移至廢液區(9)丟棄；

(6)對n個固定抗原所在位置進行檢測，進行樣本中抗體含量定性或定量檢測；

所述n個固定抗原所在位置為以m列排布，含熒光標記的二抗溶液為m種，并且，第一種含熒光標記的二抗溶液、第二種含熒光標記的二抗溶液……和第m種含熒光標記的二抗溶液分別與其中第一列固定抗原、第二例固定抗原……和第m列固定抗原進行反應；

其中，n為≥1的正整數；且m為≥1的正整數。

7.根據權利要求6所述的數字微流控自身免疫抗體多重檢測的方法，其特征在于，步驟(6)所述檢測為采用熒光檢測模塊實現樣本中抗體定性或定量檢測。

8.根據權利要求6所述的數字微流控自身免疫抗體多重檢測的方法，其特征在于，所述孵育反應的溫度為4-45℃，優選為37℃；

優選地，所述孵育反應的時間為1-30min，優選為3-5min。