[發明專利]一種細辛中6種馬兜鈴酸類成分的含量測定方法

有效

• 申請號: 202110459799.0
• 申請日: 2021-04-27
• 公開（公告）號: CN113252810B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 劉永利;孫慧珠;王曉蕾;王常順
• 申請（專利權）人: 河北省藥品醫療器械檢驗研究院（河北省化妝品檢驗研究中心）
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
• 代理公司: 石家莊眾志華清知識產權事務所(特殊普通合伙) 13123
• 代理人: 周勝欣

本發明公開了一種細辛中6種馬兜鈴酸類成分的含量測定方法，屬于中藥技術領域，采用UPLC?MS/MS法同時測定細辛中馬兜鈴酸A、馬兜鈴酸B、馬兜鈴酸C、馬兜鈴酸D、馬兜鈴酸Ⅲ及馬兜鈴酸Ⅶa含量的方法，專屬性更強，控制成分更多，且對不同藥用部位進行全方位測定分析，從而對藥材質量的進行更全面的評估，對細辛藥材的合理應用提供依據。

技術領域

本發明涉及一種細辛中6種馬兜鈴酸類成分的含量測定方法，具體的，涉及一種同時測定細辛中馬兜鈴酸A、馬兜鈴酸B、馬兜鈴酸C、馬兜鈴酸D、馬兜鈴酸Ⅲ及馬兜鈴酸Ⅶa六種成分含量的測定方法，屬于中藥技術領域。

背景技術

馬兜鈴酸(Aristolochic?acid，AA)為硝基菲類化合物，主要存在于馬兜鈴屬植物中。因馬兜鈴酸具有強烈的致癌性，2003年以來，我國藥品監管部門先后取消了青木香、關木通、廣防己、天仙藤、馬兜鈴等藥材的質量標準，《中國藥典》2020年版一部中僅收錄了細辛。細辛為馬兜鈴科植物北細辛、漢城細辛或華細辛的干燥根和根莖，標準中采用HPLC法對其中的馬兜鈴酸Ⅰ(即馬兜鈴酸A)進行了限量檢查。

馬兜鈴酸為一類物質，研究發現馬兜鈴酸A、B均具有致突變作用，且馬兜鈴酸B的致突變作用強于馬兜鈴酸A。另外馬兜鈴酸D也很可能是馬兜鈴酸中具有遺傳毒性的成分。因此，測定任何單一成分不足以全面衡量藥材毒性，使其使用存在一定的安全隱患。建立一種能同時檢測多種馬兜鈴酸類成分的方法，對此類藥材質量和安全性控制將具有重要的意義。

關于藥材中馬兜鈴酸類成分測定的分析方法，已經有很多研究報道，主要采用反相高效液相色譜法(RPLC)和高效液相串聯質譜法(HPLC-MS)，但對入藥率最高的細辛無相關報道，且主要集中于馬兜鈴酸I、II等個別成分。

發明內容

本發明需要解決的技術問題是提供一種細辛中6種馬兜鈴酸類成分的含量測定方法，能夠同時測定馬兜鈴酸A、馬兜鈴酸B、馬兜鈴酸C、馬兜鈴酸D、馬兜鈴酸Ⅲ及馬兜鈴酸Ⅶa的含量，從而對藥材質量的評估更全面。

為解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：

一種細辛中6種馬兜鈴酸類成分的含量測定方法，采用UPLC-MS/MS法同時測定藥材中馬兜鈴酸A、馬兜鈴酸B、馬兜鈴酸C、馬兜鈴酸D、馬兜鈴酸Ⅲ及馬兜鈴酸Ⅶa含量的方法。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述藥材為細辛。

本發明技術方案的進一步改進在于：分別配制混合對照品溶液和供試品溶液，精密吸取混合對照品溶液與供試品溶液各1μl，注入超高效液相色譜質譜聯用儀，測定，外標法計算含量，即得。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述對照品溶液的配制方法為：取馬兜鈴酸A、B、C、D、Ⅲ及Ⅶa對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml中各含10～50ng的混合對照品溶液，即得。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述對照品溶液為加甲醇制成每1ml中各含50ng的混合對照品溶液。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述供試品溶液的配制方法為：取供試品粉末，過四號篩，取0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理30～60分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用70％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，即得。

本發明技術方案的進一步改進在于：所述供試品溶液的配制過程中超聲處理30分鐘。

本發明技術方案的進一步改進在于：色譜條件為：

色譜柱：Water?C₁₈柱1.7μm?2.1×50mm；

以乙腈為流動相A，0.1％～0.2％甲酸為流動相B，采用梯度洗脫，

0～7min，流動相A：28％，流動相B：72％；