[發明專利]一種用于白色念珠菌檢測的探針、方法及應用

在審

• 申請號: 202110451642.3
• 申請日: 2021-04-26
• 公開（公告）號: CN112941231A
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 雷桅;姚清媚;鄧烈華;陳大風;童希文;羅輝;陳光華;張良清
• 申請（專利權）人: 南方海洋科學與工程廣東省實驗室（湛江）;廣東醫科大學附屬醫院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/725
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 張換君

本發明公開了一種用于白色念珠菌檢測的探針、方法及應用，屬于分子生物學檢測技術領域。所述探針是根據白色念珠菌rDNA間隔區的核苷酸序列設計，所述探針源自如下任一項所示序列：1)如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；2)如1)所示序列的其中一段不少于15bp的寡核苷酸序列；3)由1)或2)所示序列經過缺失、取代或插入得到的具有95％以上同源性的核苷酸序列。本發明利用該探針實現了白色念珠菌菌種鑒別和臨床檢測；本發明不僅為白色念珠菌感染性疾病的快速檢測、病原鑒定和公衛防控提供了一種方便快速、準確高效的技術策略，而且為感染性疾病的精準醫學奠定了基礎。

技術領域

本發明涉及分子生物學檢測技術領域，涉及一種用于白色念珠菌檢測的探針、方法及應用，具體涉及一種用于沿海人群呼吸道白色念珠菌快速檢測的探針、方法及應用。

背景技術

海洋環境相關疾病種類繁多，對人類健康造成嚴重危害，特別是南海作為我國唯一的熱帶海域，環境影響因素更加復雜而認識基礎不足，因此建立高效的疾病防控技術和健康管理模式具有重要意義。環境病原微生物可引起多種感染性疾病，如海洋、海洋生物中常見的細菌會引發嚴重的呼吸、消化和皮膚系統致病損傷，海洋創傷弧菌感染導致急性敗血癥甚至死亡，然而由于海洋環境復雜、取樣較難和流行病研究滯后，限制了其快速檢測技術的應用，因此研究和開發其診斷和干預技術體系已成為海洋健康工程研究領域的熱點。近年來宏基因組學、轉錄組學、分子生物學等新技術及分子診斷、靶向治療等精準醫療取得重大突破，為推動海洋環境相關疾病防控和健康管理提供了技術支撐。

白色念珠菌(Monilia albican或Canidia Albicans)是一種真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，腸道及陰道，一般在正常機體中數量少，不易引起疾病，當機體免疫功能或一般防御力下降或正常菌群相互制約作用失調，則該菌大量繁殖并改變生長形式(芽生菌絲相)侵入細胞引起疾病。

念珠菌病主要是白色念珠菌引起的急性、亞急性或慢性感染，是最常見的真菌病。常侵犯皮膚、粘膜，也可引起內臟或全身感染。臨床癥狀錯綜復雜，急緩不一。兒童多為急性繼發性感染。近年來隨著大劑量抗生素、激素、免疫抑制劑的應用，以及器官移植術的開展，其發病率漸趨增高，并可危及生命造成嚴重后果。生殖器念珠菌病分為念珠菌性陰道炎和念珠菌性龜頭炎。兩者與性行為關系密切，可以通過性行為互相傳播。

至今，未見呼吸道白色念珠菌ITS序列的克隆與特異性核酸分子探針，及其在菌種鑒別中應用的報道，至今尚未發現與本發明主題有密切聯系文獻的報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種用于白色念珠菌檢測的探針、方法及應用，以解決上述現有技術存在的問題，是白色念珠菌rDNA間隔區的核苷酸序列(ITS)序列設計探針，該探針準確可靠、操作性強、靈敏度高進行菌種鑒定、臨床檢測以及分子診斷，對于白色念珠菌感染性疾病以及環境中白色念珠菌的快速檢測具有重要意義。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明提供一種用于白色念珠菌檢測的探針，所述探針是根據白色念珠菌rDNA間隔區的核苷酸序列設計，所述探針源自如下任一項所示序列：

1)如SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；

2)如1)所示序列的其中一段不少于15bp的寡核苷酸序列；

3)由1)或2)所示序列經過缺失、取代或插入得到的具有95％以上同源性的核苷酸序列。

優選的是，所述白色念珠菌rDNA間隔區的核苷酸序列包含a)或b)：

a)所述白色念珠菌rDNA間隔區的核苷酸序列為與SEQ ID NO：1所示序列中的第7-148位核苷酸序列具有95％的同源性的序列；

b)所述白色念珠菌rDNA間隔區的核苷酸序列為可與SEQ ID NO：1所示序列中的第7-148位核苷酸序列雜交的序列。