[發明專利]含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液及其制備方法

在審

• 申請號: 202110449175.0
• 申請日: 2021-04-25
• 公開（公告）號: CN113171333A
• 公開（公告）日: 2021-07-27
• 發明（設計）人: 王欽富;周詩潔;黃晶;王芷怡;柏顯昌;詹寧薇;王美辰
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: A61K8/98
• 分類號: A61K8/98;A61K8/64;A61K8/65;A61K8/34;A61K8/73;A61K8/81;A61K8/60;A61K8/49;A61K8/44;A61Q19/00;A61Q17/00;A61P17/10;A61P31/04;C12N1/20
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 畢進

1.含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液，其特征是，首先進行痤瘡病原菌的培養，制備細菌菌體抗原和蛋白質抗原，免疫雞制備高效卵黃抗體，提取卵黃抗體IgY；制備納米明膠顆粒，用納米明膠顆粒包裹卵黃抗體制成納米卵黃抗體原液，最后添加保濕劑、流動調節劑、活性成分和增濕劑，制成多效修護面膜液。

2.如權利要求1所述的含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液，其特征是，所述的保濕劑為1，3-丁二醇、1，2-戊二醇、甘油；所述的流動調節劑為羥乙基纖維素、卡波姆、黃原膠；所述的活性成分為海藻糖、尿囊素、絲氨酸、谷氨酸；所述的增稠劑為PEG。

3.含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液的制備方法，包括如下步驟：

步驟S1：痤瘡病原菌的培養；

步驟S2：三種細菌的蛋白質抗原和菌體抗原制備；

步驟S3：卵黃抗體制備；

步驟S4：卵黃抗體提?。?/p>

步驟S5：納米明膠顆粒制備；

步驟S6：納米明膠顆粒包裹卵黃抗體；

步驟S7：制備面膜原液。

4.如權利要求3所述的含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液制備方法，其特征是，所述的步驟S1包括：

(1)葡萄球菌的培養

利用LB培養基培養金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌，將LB培養基置于高壓滅菌鍋滅菌，待其冷卻后在超凈臺中無菌接種，并放入恒溫箱培養；

(2)痤瘡丙酸桿菌的培養

將LB培養基調節pH6.8-7.0，隨后與液體石蠟分別高溫高壓滅菌，待其冷卻后在超凈臺中無菌接種痤瘡丙酸桿菌，隔絕氧氣迅速用橡膠塞塞緊瓶口，最后將接種后的LB培養基放在臺式恒溫振蕩器中37℃培養。

5.如權利要求3所述的含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液制備方法，其特征是，所述的步驟S2包括：

利用甲醛法和煮法分別滅活這三種菌體，分別得到金黃色葡萄球菌蛋白質抗原、金黃色葡萄球菌菌體抗原、表皮葡萄球菌蛋白質抗原、表皮葡萄球菌菌體抗原、痤瘡丙酸桿菌蛋白質抗原、痤瘡丙酸桿菌菌體抗原。

6.如權利要求3所述的含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液制備方法，其特征是，所述的步驟S3包括：

從雞場購入產蛋母雞，不注射抗原飼養一周，確保產蛋母雞能正常下蛋后，在雞的頸部和翅膀皮下多點分別注射80μg步驟S2的各種細菌抗原，在初次免疫兩周后進行第二次免疫，之后每間隔一周免疫一次，加強免疫三次。

7.如權利要求3所述的含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液制備方法，其特征是，所述的步驟S4包括：

采用水稀釋-硫酸銨法：取免疫后的蛋黃，用超純水稀釋卵黃，卵黃和水體積比為1:8，混勻等待分層，取上清液加入等體積的飽和硫酸銨，調節pH為5.0；隨后，離心后棄上清，用PBS溶解懸浮沉淀，將抗體裝入透析袋中，將透析袋放入透析液里，4℃環境下持續攪拌除鹽，每2h更換一次透析液，一共透析24h，制備Part D納米卵黃抗體原液。

8.如權利要求3所述的含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液制備方法，其特征是，所述的步驟S5包括：

稱取0.416-0.832g明膠于100mL燒杯中，加入8.3mL雙蒸水，于50℃，400rpm攪拌溶解，邊攪拌邊加入8.3-16.6mL丙酮，室溫靜置20min，棄去上清液，加入10mL雙蒸水，50℃，200rpm徹底溶解底部沉淀，加入1mol/L的HCl調節pH至2.5；滴加丙酮30-60mL，再加入以戊二醛和丙酮體積比為1:1000配置的溶液2-4mL，室溫1000rpm持續攪拌5h，揮發丙酮及戊二醛，用雙蒸水稀釋10倍，使用40KD透析袋，在雙蒸水中透析24h后，在-4℃靜置保存。

9.如權利要求3所述的含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液制備方法，其特征是，所述的步驟S6包括：

調節明膠納米顆粒溶液pH 7.0，向濃度為1mg/mL的納米顆粒中加入45μg卵黃抗體，室溫震蕩2h后，進行包封率鑒定，檢測釋放速率。

10.如權利要求3所述的含有納米包埋卵黃抗體的多效修護面膜液制備方法，其特征是，所述的步驟S7包括：

(1)制備Part A：稱取體積百分數為6％的1,3-丁二醇、4％的1,2-戊二醇、8％的甘油、2％的泛醇和質量百分數為0.2％的羥乙基纖維素、0.1％的卡波姆、0.2％的黃原膠、0.2％的尿囊素、1％的海藻糖、0.1％的EDTA二鈉、0.5％的絲氨酸于燒杯中，混勻備用；

(2)將Part A攪拌，分散均勻至無不溶物，加熱至80-85℃，轉速為500rpm，保溫20min，開始降溫；

(3)降溫至45℃，加入Part B原料：質量百分數為2％的甜菜堿和0.25％的谷氨酸，攪拌至無不溶物；

(4)加入Part C：質量百分數為0.5％的PEG，至A和B混合液中，攪拌至均勻透明，置于室溫條件下，待其正常散熱降溫；

(5)將Part A、Part B和Part C混合，加入已制備的Part D：納米卵黃抗體原液，攪拌均勻，三者混合液與Part D的體積比為10:1；

(6)使用300目濾布過濾出料；

(7)基礎面膜穩定性測定。