[發明專利]苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒及其制備方法

有效

• 申請號: 202110440704.0
• 申請日: 2021-04-23
• 公開（公告）號: CN113238057B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發明（設計）人: 張旭東;李冬梅;孟令敏;高威;孫成艷
• 申請（專利權）人: 迪瑞醫療科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產權代理有限公司 22214
• 代理人: 王瑩

1.苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，包括R1試劑、R2試劑和R3試劑；

所述R1試劑包括鏈霉親和素羧基磁顆粒和緩沖液Ⅰ；

所述R2試劑包括化學發光標記物標記的苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體和緩沖液Ⅱ；

所述R3試劑包括偶聯標記物標記的苗勒氏管抑制物受體抗原和緩沖液Ⅲ；

所述緩沖液Ⅱ包括0.01wt％～0.06wt％的添加劑，添加劑為0.01wt％～0.03wt％聚氨丙基雙胍和0.01wt％～0.03wt％聚六亞甲基雙胍。

2.根據權利要求1所述的苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述鏈霉親和素羧基磁顆粒的粒徑是2～3μm。

3.根據權利要求1所述的苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述化學發光標記物標記的苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體中，苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體與化學發光標記物的物質的量比是1:(3～20)；所述化學發光標記物為吖啶酯。

4.根據權利要求1所述的苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述偶聯標記物標記的苗勒氏管抑制物受體抗原中，苗勒氏管抑制物受體抗原與偶聯標記物的物質的量比為1:(5～20)；所述偶聯標記物為生物素。

5.根據權利要求1所述的苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，包括R1試劑、R2試劑和R3試劑；

所述R1試劑包括鏈霉親和素羧基磁顆粒和緩沖液Ⅰ，R1試劑中鏈霉親和素羧基磁顆粒的質量百分濃度為0.01％～1％；

所述R2試劑包括化學發光標記物標記的苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體和緩沖液Ⅱ，R2試劑中化學發光標記物標記的苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體的濃度為0.1～2.0μg/mL；

所述R3試劑包括偶聯標記物標記的苗勒氏管抑制物受體抗原和緩沖液Ⅲ，R3試劑中偶聯標記物標記的苗勒氏管抑制物受體抗原的濃度為0.2～3.0μg/ml。

6.根據權利要求1所述的苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述緩沖液Ⅰ包括100mM MES和0.02％吐溫-20，pH為6.0～6.5；

所述緩沖液Ⅱ包括100～500mM PB、0.01％～0.1％吐溫-20、0.01％～0.03％聚氨丙基雙胍和0.01％～0.03％聚六亞甲基雙胍，pH為6.0；

所述緩沖液Ⅲ包括100～500mM PB和0.01％～0.1％吐溫-20，pH為6.0。

7.根據權利要求1所述的苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒中還包括校準品；所述校準品包括濃度分別為0pg/mL、0.5pg/mL、2.0pg/mL、5.0pg/mL、15.0pg/mL、30.0pg/mL和50.0pg/mL的苗勒氏管抑制物受體蛋白溶液。

8.權利要求1～6任意一項所述的苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，本發明還提供上述苗勒氏管抑制物受體化學發光免疫檢測試劑盒的制備方法，包括以下步驟：

步驟一、制備R1試劑

將鏈霉親和素羧基磁顆粒溶液放置于磁分離器上，直至上清無混濁，棄上清，留取磁顆粒，使用緩沖液Ⅰ清洗磁顆粒后，再用緩沖液Ⅰ配成磁顆粒質量百分濃度為0.02％～1％的固相試劑，即為R1試劑；

步驟二、制備R2試劑

先將苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體放入離心管中，保證苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體位于離心管底部位置后加入碳酸緩沖液，充分混勻，混勻后加入含有化學發光標記物的DMF溶液，經封閉、純化，得到化學發光標記物標記的苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體，最后將收集好的化學發光標記物標記的苗勒氏管抑制物受體單克隆抗體用緩沖液Ⅱ稀釋至終濃度為0.1～2.0μg/mL，即為R2試劑；

步驟三、制備R3試劑

取苗勒氏管抑制物受體抗原，用pH為6.0～6.5的TRIS緩沖液透析純化后加入已活化的長鏈磺化生物素，經封閉、純化，得到偶聯標記物標記的苗勒氏管抑制物受體抗原，最后將收集好的偶聯標記物標記的苗勒氏管抑制物受體抗原用緩沖液Ⅲ稀釋至終濃度為0.1～2.0μg/mL，即為R3試劑。