[發(fā)明專利]從顯齒蛇葡萄葉中提取二氫楊梅素的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110436078.8
• 申請日: 2021-04-22
• 公開（公告）號(hào): CN113121487A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉常青;宋力飛;廖光毅;馬志鵬;劉鄉(xiāng)鄉(xiāng)
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州澤力醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): C07D311/32
• 分類號(hào): C07D311/32;C07D311/40
• 代理公司: 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 44224
• 代理人: 王秉麗

本發(fā)明涉及一種從顯齒蛇葡萄葉中提取二氫楊梅素的方法，所述方法包括如下步驟：取顯齒蛇葡萄葉和水，以料液比為1：(25～35)混合；采用80℃～98℃的溫度對(duì)混合所得體系進(jìn)行加熱回流提取0.4h～0.6h，收集提取液。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具備如下有益效果：采用傳統(tǒng)方法從顯齒蛇葡萄葉中提取二氫楊梅素，提取率非常低本發(fā)明的發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)，在從顯齒蛇葡萄葉中提取二氫楊梅素的過程中，通過采用加熱回流的方式并配合調(diào)整料液比以及加熱回流條件，能夠大幅度提升二氫楊梅素的提取率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥有效成分提取技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種從顯齒蛇葡萄葉中提取二氫楊梅素的方法。

背景技術(shù)

顯齒蛇葡萄葉，來源于葡萄科(Vitaceae)蛇葡萄屬(Ampelopsis Michx.)的顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata(Hand.-Mazz)W.T.Wang)，產(chǎn)地眾多，主要分布于我國湖北、湖南、重慶、貴州、廣西、福建等長江以南地區(qū)，是近年來研究較多的藥茶兩用中藥之一。將顯齒蛇葡萄的嫩莖葉曬干后，茶葉色綠起白霜，俗稱藤茶，開水沖泡后其味微苦甘長，民間已有近千年的飲用歷史，常用于肝火過盛、咽喉炎、心腦血管疾病等的防治。其中，二氫楊梅素是其最主要的活性成分，含量可高達(dá)30％以上。現(xiàn)代科學(xué)研究表明，二氫楊梅素具有清除自由基、提升機(jī)體免疫力、抗腫瘤、保護(hù)神經(jīng)、調(diào)節(jié)血脂以及保肝護(hù)肝等多種生物活性，是顯齒蛇葡萄葉多種健康促進(jìn)功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。二氫楊梅素的藥理功效顯著，作用獨(dú)特，具有很好的臨床應(yīng)用與產(chǎn)品開發(fā)的前景。

傳統(tǒng)的從顯齒蛇葡萄葉中提取二氫楊梅素的方法，例如：

一種快速提取顯齒蛇葡萄葉中高純度二氫楊梅素的方法，包括如下步驟：

(1)粉碎：干葉，粉碎至10目～20目；(2)浸洗：放入水中，料液質(zhì)量體積比為1:100(g/mL)，常溫浸泡6小時(shí)；(3)提取：重新加水，95℃提取60分鐘，并趁熱分離提取液；(4)結(jié)晶：室溫或制冷冷卻提取液，于4℃～10℃促進(jìn)結(jié)晶，過濾獲得粗品；(5)重結(jié)晶：加沸水至粗品全部溶解，重結(jié)晶，濾母液，獲得產(chǎn)品。

一種提高顯齒蛇葡萄中二氫楊梅素得率的方法，由以下步驟組成：(1)采摘重慶酉陽顯齒蛇葡萄鮮葉，并將顯齒蛇葡萄葉在溫度為100℃條件下烘烤1h；

(2)將取烘干處理的顯齒蛇葡萄粉碎，過40目篩，得到顯齒蛇葡萄粉末，備用；

(3)稱取100g的顯齒蛇葡萄粉末加入到2000mL體積分?jǐn)?shù)為95％的乙醇溶液中，超聲提取30min，濾過得到二氫楊梅素提取液；(4)將步驟(3)制備得到二氫楊梅素提取液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，溫度為50℃水浴中減壓濃縮，回收乙醇至無醇味，加1000mL沸水溶解，置于4℃低溫環(huán)境下放冷析晶，濾過，60℃烘干濾餅即為二氫楊梅素提取物。

一種從顯齒蛇葡萄葉中分離純化二氫楊梅素的方法，依照以下步驟：(1)顯齒蛇葡萄干葉粉碎后過20目篩，加入濃度為40％～80％乙醇水溶液，料液比為顯齒蛇葡萄葉(重量kg)：乙醇水溶液(體積L)＝1:20，在室溫條件下攪拌提取60min，經(jīng)常規(guī)過濾獲得提取液；(2)提取液依次通過微濾一級(jí)膜和超濾二級(jí)膜，得到純化提取液；(3)將步驟(2)所得純化提取液經(jīng)溫度為60℃真空濃縮，回收乙醇，得到濃縮液；(4)將步驟(3)所得濃縮液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2～3，置于室溫條件下靜置48h，過濾收集沉淀；(5)將步驟(4)所得沉淀用95％乙醇加熱溶解后經(jīng)微濾一級(jí)膜除去不溶雜質(zhì)，往濾液中加入4倍～10倍體積的水后，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2～3并置于室溫條件下靜置48h，過濾收集沉淀；(6)將步驟(5)所得沉淀用90℃熱水充分?jǐn)嚢韬笕芙猓仂o置2h～4h，上層清液經(jīng)常規(guī)過濾后，用鹽酸調(diào)節(jié)pH至2～3并置于室溫條件下靜置48h，過濾收集沉淀，干燥后即得到二氫楊梅素純品。