[發明專利]抗體標準品賦值和抗原中和當量確定的方法

有效

• 申請號: 202110435070.X
• 申請日: 2020-07-15
• 公開（公告）號: CN113125756B
• 公開（公告）日: 2022-10-25
• 發明（設計）人: 許行尚;杰弗瑞·陳;王鵬
• 申請（專利權）人: 南京嵐煜生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/53
• 代理公司: 南京正聯知識產權代理有限公司 32243
• 代理人: 顧伯興

本發明涉及一種抗體標準品賦值和抗原中和當量確定的方法，具體包括以下步驟：S1抗體標準品或樣品的抗原中和當量的確定：將已知純度和濃度的抗原用基質進行梯度稀釋，向每個不同濃度的梯度稀釋液中分別加入等量的抗體標準品或含有抗體的樣品，反應后，用第一抗體檢測試劑對每個混合液進行抗體檢測確定抗體標準品或樣品的抗原中和當量；其中一定體積中抗體標準品或樣品中抗體的抗原中和當量的計量單位以其中抗體可中和抗原的質量?體積濃度表示，為了特別明確質量?體積單位中的質量數是相應中和抗原的量，故而在質量單位后面加上“NAE”如：1ng NAE/mL、1μg NAE/mL、1mg NAE/mL等。

本申請是申請號為“202010679432.5”，申請日為“2020年07月15日”，發明名稱為“抗體標準品賦值和抗體檢測試劑最低檢出限確定的方法”中國發明專利申請的分案申請。

技術領域

本發明涉及醫學檢測技術領域，尤其涉及一種抗體標準品的賦值和抗原中和當量確定的方法。

背景技術

體外診斷(In Vitro Diagnosis,IVD)醫療器械是通過對人體的樣品(血液、體液、組織等)進行檢測而獲取臨床診斷信息的產品，包括試劑、校準品、控制物質、設備或系統。診斷試劑是檢測患者是否患病和病情程度的基本工具之一，其結果是否準確直接影響到醫生的診斷以及患者的身體健康和生命安全。而隨著現代醫學科技的進步，對于醫學檢驗的結果提出了更加精準的要求，從而對體外診斷產品的質量要求也越來越高。

標準物質(如國際標準、國家標準、企業標準和臨床應用的校準品等)的制備及其量值溯源是獲得精準測定結果的前提條件。由于抗體的儲存穩定性差，即使深低溫保存亦會隨著保存時間的延長，而活性逐漸降低；而且，抗體的活性多用相對的稀釋滴度表示，很難客觀精準量化。因此，各種抗體的標準品或參考物質的制備十分困難。目前國內外均缺乏有關抗體標準品的商品供應，給抗體檢測試劑的生產和應用帶來了許多難以克服的困難。

另一方面，抗體檢測試劑的一個重要的性能參數是檢出限。檢出限是指生物樣品按照分析方法的要求進行處理并檢測，能區分于噪聲的以特定置信水平報告被測量存在的最低值，它也被用來指最小可檢測濃度，可見檢出限也是一個量化指標。由于缺乏抗體的標準品，抗體檢測試劑的最低檢出限也無從精準確定。

因此，有必要開發一種能夠準確定量抗體的方法。雖然抗體的活性不穩定，但是和抗體對應的抗原通常比較穩定，而且可以準確定量。利用抗原可以和抗體發生中和反應(中和反應是抗原決定簇和抗體識別端Fab的反應)，可根據抗體需要多少抗原來中和其活性來定量抗體活性，也就是給抗體賦值。我們把單位體積基質(如血清)中的抗體需要多少相應的抗原來中和稱作抗體的“抗原中和當量(Neutralized Antigen Equivalent，NAE)”。用抗原中和當量的大小來定量抗體的多少，抗體的抗原中和當量越大表示在單位體積基質中的抗體越多。借此，我們就可以定量抗體，給抗體標準物質賦值，確定抗體檢測試劑的最低檢出限。

發明內容

本發明要解決的技術問題是，提供一種抗體標準品賦值和抗原中和當量確定的方法。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：該抗體標準品賦值和抗原中和當量確定的方法，具體包括以下步驟：

S1抗體標準品或樣品的抗原中和當量的確定：將已知純度和濃度的抗原用基質進行梯度稀釋，獲得多個不同濃度的梯度稀釋液；向每個不同濃度的梯度稀釋液中分別加入等量的抗體標準品或含有抗體的樣品，反應后，用第一抗體檢測試劑對每個混合液進行抗體檢測，從而確定抗體標準品或樣品的抗原中和當量；所述步驟S1抗體標準品或樣品的抗原中和當量的確定的方法即是一定體積中抗體量的賦值方法。其中一定體積中抗體標準品或樣品中抗體的抗原中和當量的計量單位以其中抗體可中和抗原的質量-體積濃度表示，為了特別明確質量-體積單位中的質量數是相應中和抗原的量，故而在質量單位后面加上“NAE”如：1ng NAE/mL、1μg NAE/mL、1mg NAE/mL等。