[發(fā)明專利]羥自由基近紅外熒光分子探針及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110430599.2
• 申請(qǐng)日: 2021-04-21
• 公開（公告）號(hào): CN113135904B
• 公開（公告）日: 2022-03-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田蔣為;高涵;章琳霞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)藥科大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D405/06
• 分類號(hào): C07D405/06;C09K11/06;G01N21/64;G01N21/33
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 楊曉莉

本發(fā)明公開了一種羥自由基近紅外熒光分子探針及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明羥自由基近紅外熒光分子探針，選擇性強(qiáng)、靈敏度高、響應(yīng)效果好，并且其近紅外吸收與熒光的發(fā)射特性使其能避免生物自發(fā)熒光干擾，可以檢測(cè)溶液、細(xì)胞中的羥自由基，并很好地運(yùn)用于細(xì)胞成像等。并且，其制備工藝簡(jiǎn)單，成本低，收率高，具有廣闊的應(yīng)用前景，可以大規(guī)模生產(chǎn)應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于熒光分子探針技術(shù)，具體涉及一種羥自由基近紅外熒光分子探針及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

細(xì)胞內(nèi)活性氧是一類反應(yīng)性物質(zhì)，主要通過(guò)電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)起源于氧，它們?cè)诟鞣N細(xì)胞過(guò)程中起著至關(guān)重要的信號(hào)傳導(dǎo)因子的作用，其中，羥自由基由于具有特別強(qiáng)的氧化性和2.31V的單電子還原電位而備受關(guān)注。大量研究證實(shí)，羥自由基可以通過(guò)堿基的氧化羥基化作用與DNA反應(yīng)，誘導(dǎo)脂質(zhì)過(guò)氧化，并對(duì)蛋白質(zhì)造成氧化損傷。過(guò)量產(chǎn)生的羥自由基與各種氧化應(yīng)激相關(guān)的病理生理過(guò)程有關(guān)，例如炎癥，癌癥和心血管疾病等。然而，由于其低濃度，短壽命和高反應(yīng)性導(dǎo)致的檢測(cè)困難，在生理和病理過(guò)程中羥自由基的性質(zhì)仍然知之甚少。因此，開發(fā)用于生物系統(tǒng)中羥自由基的高靈敏度和選擇性檢測(cè)工具非常重要。

傳統(tǒng)檢測(cè)羥自由基的熒光探針多數(shù)都是可見光激發(fā)，這種探針在與羥自由基響應(yīng)后產(chǎn)生的熒光很容易受到生物體自發(fā)熒光的干擾。而近紅外熒光分子探針具有靈敏度高，選擇性好，組織穿透性強(qiáng)，檢測(cè)方便等優(yōu)點(diǎn)，相較于傳統(tǒng)羥自由基的檢測(cè)方法具有很大的優(yōu)勢(shì)。但是如何得到性能更加優(yōu)異的近紅外熒光分子探針，還需要進(jìn)一步研究。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N具有良好的選擇性的羥自由基近紅外熒光分子探針，并提供了其制備方法以及應(yīng)用。

技術(shù)方案：本申請(qǐng)所述一種羥自由基近紅外熒光分子探針，其分子式為C₃₅H₃₃INO₅⁺，結(jié)構(gòu)式如下：

本申請(qǐng)所述的羥自由基近紅外熒光分子探針的制備方法，反應(yīng)路線如下所示：

包括如下步驟：

(1)在惰性氣體保護(hù)條件下，將化合物1加入到N,N-二甲基甲酰胺中，攪拌，待完全溶解后，加入三乙胺，攪拌反應(yīng)；

(2)在惰性氣體保護(hù)條件下，繼續(xù)加入3,5-二碘水楊酸，攪拌反應(yīng)；

(3)在惰性氣體保護(hù)條件下，繼續(xù)攪拌加熱反應(yīng)；

(4)對(duì)步驟(3)得到的反應(yīng)液進(jìn)行萃取，合并有機(jī)層，減壓濃縮，冷凍干燥，所得固體即羥自由基近紅外熒光分子探針。

其中，所述化合物1的合成參考文獻(xiàn)：J.Huang,Y.Lyu,J.Li,P.Cheng,Y.Jiang,K.Pu,ARenal-Clearable Duplex Optical Reporter for Real-Time Imaging ofContrast-Induced Acute Kidney Injury,Angew Chem Int Ed Engl,131(2019)17960-8.

步驟(1)-(3)中，所述惰性氣體優(yōu)選氮?dú)狻?/p>

步驟(1)所述化合物1與N,N-二甲基甲酰胺的比例為1mmol:10-15mL。

步驟(1)所述化合物1、三乙胺與步驟(2)所述3,5-二碘水楊酸的優(yōu)選摩爾比為1:(3-5):(3-5)。

步驟(3)所述攪拌加熱至80-90℃進(jìn)行反應(yīng)，反應(yīng)直到溶液變?yōu)樯钏{(lán)色，通常反應(yīng)10-12h即可。

作為優(yōu)選，步驟(4)所述萃取的方法為：反應(yīng)液中加入二氯甲烷和蒸餾水，混勻，震蕩，靜置，取下層有機(jī)溶液層，重復(fù)3-4次，合并有機(jī)層。