[發明專利]一種厚樸溫中湯物質基準的質量控制方法

有效

• 申請號: 202110422712.2
• 申請日: 2021-04-16
• 公開（公告）號: CN113156010B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 李會軍;陳瀅俐;錢朵朵;孟歡歡
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/74;G01N30/04;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/90;G01N30/94;G01N30/95;G01N30/86
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 邢賢冬;徐冬濤

1.一種厚樸溫中湯物質基準的質量控制方法，其特征在于：包括：分別采用薄層色譜法、HPLC特征圖譜對厚樸溫中湯物質基準進行定性分析，采用高效液相外標一點法對厚樸溫中湯物質基準中的橙皮苷、和厚樸酚、厚樸酚進行定量分析；

采用薄層色譜法對厚樸溫中湯物質基準進行定性分析，包括：

供試品溶液制備：取厚樸溫中湯物質基準1g，加入水飽和的正丁醇10ml，超聲處理30min，濾過，濾液用正丁醇飽和水洗滌3次，每次10ml，棄去水洗液，正丁醇液蒸干，殘渣加2ml甲醇復溶，即得供試品溶液；

對照品溶液制備：稱取厚樸酚、木香烴內酯、去氫木香內酯、6-姜辣素和榿木酮、橙皮苷、甘草苷對照品于容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋，得到混合對照品溶液；

甘草苷和橙皮苷的薄層色譜鑒別：吸取對照品溶液和供試品溶液各8μl，分別點于同一用1％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，點樣寬度為10mm，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水為展開劑，展開8cm，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，在波長365nm下檢視，供試品色譜中，在與甘草苷對照品色譜相應的位置上，顯相同的黃綠色熒光斑點，在與橙皮苷對照品色譜相應的位置上，顯相同顯色的深色斑點；

厚樸酚、榿木酮、去氫木香內酯、木香烴內酯和6-姜辣素的薄層色譜鑒別：吸取對照品溶液和供試品溶液各8μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，點樣寬度為10mm，甲苯-乙酸乙酯-乙酸-甲醇為展開劑，展開10cm，取出，晾干，在波長254nm下檢視，供試品色譜中，在與厚樸酚對照品色譜相應的位置上，顯相同的淺藍色熒光斑點；再噴以1％香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與榿木酮、去氫木香內酯、木香烴內酯、6-姜辣素對照品色譜相應的位置上，顯相同的斑點；

乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水中乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸和水的體積比＝15:1:1:2；甲苯-乙酸乙酯-乙酸-甲醇中甲苯、乙酸乙酯、乙酸和甲醇的體積比＝26:2:1:0.5；

定量分析包括：

步驟(1)、制備供試品溶液：取厚樸溫中湯物質基準，加入提取溶劑，超聲提取，放冷，補足提取溶劑失重，搖勻，0.45μm濾器過濾，取續濾液作為供試品溶液；其中，所述的厚樸溫中湯物質基準和提取溶劑的用量比為0.2g:10ml～20ml；所述的提取溶劑為50％甲醇或50％乙醇；超聲提取的時間為15min～45min；

制備對照品溶液：取橙皮苷對照品、和厚樸酚對照品、厚樸酚對照品，加提取溶劑溶解，得到含橙皮苷5.26～507μg/ml、厚樸酚1.07～103.6μg/ml、和厚樸酚1.07～102.9μg/ml的混合對照品溶液；

步驟(2)、分別將供試品溶液、對照品溶液注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，用外標一點法分別計算厚樸溫中湯物質基準中的橙皮苷、和厚樸酚、厚樸酚的含量；其中，高效液相色譜的條件為：C18色譜柱，以0.1％甲酸溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，進行梯度洗脫；流速：0.8～1.0ml/min；柱溫：25℃～35℃；檢測波長：290nm；進樣體積：10μl；

梯度洗脫程序為：

2.根據權利要求1所述的厚樸溫中湯物質基準的質量控制方法，其特征在于：所述的厚樸溫中湯物質基準和提取溶劑的用量比為0.2g:10ml；所述的提取溶劑為50％乙醇；超聲提取的時間為30min。

3.根據權利要求1所述的厚樸溫中湯物質基準的質量控制方法，其特征在于：高效液相色譜的條件為：色譜柱：ZORBAX Eclipse Plus C18，4.6×250mm，5μm；以0.1％甲酸溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，進行梯度洗脫；流速：0.9ml/min；柱溫：25℃；檢測波長：290nm；進樣體積：10μl。