[發明專利]基于表面等離子效應與金團簇信號放大傳感器制備

在審

• 申請號: 202110421862.1
• 申請日: 2021-04-20
• 公開（公告）號: CN113138214A
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發明（設計）人: 顏梅;苗培;張晶;趙悅英;張增軍
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/30;G01N27/327
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.基于表面等離子效應與金團簇信號放大傳感器制備，其特征包括以下步驟：

（1）合成WS₂：將0.735g鎢粉和0.4617g硫粉充分混合在一起然后放置于低壓氬氣封管，首先以3 oC/min的速率升溫至250 oC使硫粉融化并與鎢粉充分接觸進行反應，保溫180min后，接著以3 oC/min的升溫速率升至500 oC使多余的硫升華并使WS₂重結晶，保溫90min后自然冷卻至室溫，得到黑色WS₂粉末；

（2）合成WS₂@MoS₂：將1.32g鉬酸鈉、1.60g硫脲和0.15g聚乙二醇加入到20mL去離子水中充分攪拌1h，同時將一定量的WS₂也加入到20mL去離子水溶液中充分攪拌；將兩種溶液充分混合，放入50mL高壓反應釜內，將裝有混合溶液的反應釜轉移到烘箱中加熱到200oC并保持該溫度24h，反應結束后將溶液自然冷卻，離心干燥，得到WS₂@MoS₂；

（3）Au NCs-Ag@SiO₂ NPs的制備：將4mL的1%的檸檬酸鈉加入到200mL沸騰的濃度為0.175mg/mL AgNO₃溶液中，并且持續攪拌1 h，得到Ag NPs；為了制備核殼Ag@SiO₂ NPs結構，將0.6mL氨水加入到10mL乙醇-水Ag NPs的混合溶液中；同時將20μL的10%正硅酸乙酯加入上述混合溶液中，以調節二氧化硅涂層的厚度；

（4）谷胱甘肽保護的Au NCs的制備：將2.06mL HAuCl₄溶液與22.94mL去離子水在室溫下充分混合，在攪拌下加入0.023g谷胱甘肽，待溶液變無色后，在70℃下攪拌24h；

（5）Ab2-Au NCs-Ag@SiO₂ NPs的制備：將300μL的Ag@SiO₂ NPs溶液與200μL的濃度為1mg/mL的Au NCs混合，再加入去離子水稀釋至1mL，隨后在室溫下震蕩3h，得到Au NCs-Ag@SiO₂ NPs，然后將1mL濃度為10μg/mL的二抗，即Ab₂加入到溶液中，在4°C下孵育2h；用pH7.4的磷酸鹽緩沖液洗滌3次去除沒有復合的Ab₂;

（6）光電化學傳感器的構建：導電玻璃為銦錫氧化物玻璃ITO，將導電玻璃切割為4.0×0.5cm條狀，依次用丙酮溶液、二次蒸餾水和無水乙醇超聲清洗5min，然后在氮氣下干燥備用；將20μL上述制備的WS₂@MoS₂溶液涂在ITO電極表面，在室溫下干燥，隨后把6μL濃度為10μg/mL的一抗即Ab1在4oC下孵育16h，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖液徹底沖洗3次；繼續滴涂20μL3%的牛血清白蛋白封堵非特異性結合位點，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖液徹底沖洗3次，將20μL不同濃度前列腺抗原滴加至電極表面，室溫下孵育30min，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖液洗滌3次；繼續滴加20 μL步驟（5）合成的Ab2-Au NCs-Ag@SiO₂ NPs，室溫下孵育2h；

（7）夾心型信號放大生物傳感器的光電化學檢測：在步驟（6）處理好的修飾電極作為工作電極，對電極是鉑絲電極，參比電極是Ag/AgCl電極，偏壓數值為0 V，氙燈作為光源刺激，電解池為pH 7.4的磷酸鹽緩沖液體系（1 mol/L的抗壞血酸），測定電流I-T曲線來進行光電性能的檢測。