[發明專利]一種利用大豆肽聚集體與EGCG結合制備納米顆粒的方法

在審

• 申請號: 202110418042.7
• 申請日: 2021-04-19
• 公開（公告）號: CN113100441A
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發明（設計）人: 隋曉楠;付元濤;董亞博;蘭天
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: A23L33/18
• 分類號: A23L33/18;A23L33/105
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種利用大豆肽聚集體與EGCG結合制備納米顆粒的方法，屬于大豆蛋白產品開發領域，該方法包括以下步驟：(1)大豆分離蛋白的制備(2)大豆肽聚集體的制備(3)制備大豆肽聚集體?EGCG復合納米顆粒。本發明明確了大豆肽聚集體與EGCG復合的工藝，大豆肽聚集體?EGCG納米顆粒的研發將作為一種新型乳液穩定劑，為食品工業提供更加綠色健康的食品配料。并且確定了二者復合后的多肽復合物具有更高的生物功能，該納米顆粒具有低成本，操作便捷，綠色健康的特點。

技術領域

本發明屬于大豆蛋白產品開發領域，主要涉及一種利用大豆肽聚集體與EGCG結合制備納米顆粒的方法

背景技術

表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯(EGCG)是綠茶中含量最豐富的兒茶素，也是已知的能夠捕獲大多數活性氧，如超氧化物、單線態氧、羥基自由基最有效的的茶多酚，EGCG除了具有較高的自由基清除能力外，還具有潛在的醫學應用價值，如抗病毒、抗菌和治療心血管疾病。此外，它也用作腫瘤多藥耐藥性的逆轉劑，能夠改善癌細胞對化療的敏感性并減輕對心臟的毒性。EGCG與多肽主要通過疏水相互作用相互結合，產生生物功能較高的多肽復合物。

大豆蛋白是一種營養價值豐富的食用蛋白資源，由于其較高的蛋白含量及優良的功能特性，目前已被廣泛地應用于食品加工。大豆多肽克服了大豆蛋白在營養學上的弱點,具有比大豆蛋白更豐富的營養和功能特性。大豆蛋白酶解產物擁有良好的溶解性、分散性、穩定性等理化性質，同時還具有多種生理功效，如抗氧化活性、降血壓、降膽固醇、低抗原性以及免疫調節等，因此，大豆蛋白酶解肽具有誘人的開發前景。大豆肽聚集體已經成為有效的輔助制劑,在發酵工業中,大豆肽聚集體可以作為微生物的營養源,促進微生物生長和代謝；在食品工業中,大豆肽聚集體可以應用于焙烤食品、糖果糕點和冷飲食品中,既降低了成本,也改善了產品的風味、口感和組織狀態等。

本發明通過一種利用大豆肽聚集體與EGCG結合制備納米顆粒，一方面可以彌補大豆肽聚集體不溶性的缺陷，增加大豆蛋白水解利用率；另一方面，通過探究其在穩定乳液中的潛力，還為食品工業提供更加綠色健康的乳液穩定劑材料。

本研究的目的是通過與EGCG絡合來進一步改善大豆肽聚集體的物理和化學性質。通過對大豆肽聚集物-EGCG復合納米顆粒進行了超聲處理，分析了它們的結構和功能特性，包括它們在穩定乳狀液中的潛力。為蛋白質的水解領域的研究做出了貢獻，并為大豆肽聚集體在食品工業中的進一步應用提供了基礎。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服上述現有技術的不足，提供種利用茶多酚與多肽結合制備多肽復合物，達到提高酶解物得利用率；優化酶解物生物功能的效果。實現功能性多肽的粒子大小合適；抗氧化活性提高；提高生物利用度的目的。

本發明所要解決的技術問題是通過以下技術方案來實現的：

一種利用大豆肽聚集體與EGCG結合制備納米顆粒的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將大豆磨粉過60目篩，與正己烷混合(1：3)進行三次脫脂得到脫脂豆粉。將脫脂豆粉溶于去離子水中(1：10，w/w)，并用2mol/L NaOH調節pH至8.0。所得漿液在45℃條件下連續攪拌2h，并在10000g離心30min后收集上清液。用2mol/L HCl調節上清液pH至4.5沉淀蛋白質，然后在6500g 下離心20min收集沉淀。將得到的沉淀水洗三次，并用2mol/L NaOH調節pH至中性后冷凍干燥得到大豆分離蛋白粉末。

(2)將凍干大豆分離蛋白(SPI)粉末溶于去離子水中(4％，w/v)，于50℃下加熱攪拌20min以達到堿性蛋白酶的最適溫度。在SPI溶液中加入堿性蛋白酶(1％,v/w)持續酶解20min-3h，并在酶解過程中用2M NaOH始終保持SPI溶液的pH為8.5。將酶解后的混合物調節pH至中性，進行離心，將含有大部分大豆肽聚集體酶解物(SPHs)的上清液分離，取沉淀凍干得到肽聚集體(SPA)；