[發明專利]一種用于藍莓組織培養的培養基及培養方法

有效

• 申請號: 202110414403.0
• 申請日: 2021-04-16
• 公開（公告）號: CN112931223B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發明（設計）人: 周揚顏;孫衛健;陳文秀;莫翱瑋;郭鵬;許鵬昊
• 申請（專利權）人: 山東大豐園農業有限公司
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00;A01H4/00;A01G17/00;A01G24/15;A01G24/10;A01G24/22
• 代理公司: 北京五洲洋和知識產權代理事務所(普通合伙) 11387
• 代理人: 榮紅穎;張洪生

1.一種用于藍莓組織培養的培養基組合，所述培養基組合包括愈傷誘導培養基、生芽培養基和生根培養基；

所述愈傷誘導培養基由WPM培養基、4-8g/L瓊脂、20-30g/L蔗糖、2.0-4.0mg/L CPPU和0.1-0.4mg/L 2-ip組成，所述愈傷誘導培養基的pH為5.0-5.5；

所述生芽培養基由WPM培養基、4-8g/L瓊脂、20-30g/L蔗糖、1.0mg/L CPPU和0.4-0.6mg/L 2-ip組成，所述生芽培養基的pH為5.0-5.5；

所述生根培養基由1/2MS培養基、5-9g/L瓊脂、15-25g/L蔗糖和2.0-3.0mg/L NAA組成，所述生根培養基的pH為5.0-5.5；

所述WPM培養基由400mg/L硝酸銨、370mg/L七水硫酸鎂、278mg/L四水硝酸鈣、200mg/L硝酸鉀、170mg/L磷酸二氫鉀、8.6mg/L七水硫酸鋅、22.4mg/L一水硫酸錳、0.25mg/L二水鉬酸鈉、0.25mg/L五水硫酸銅、73.4mg/L乙二胺四乙酸鈉鐵、100mg/L肌醇、2mg/L甘氨酸、0.5mg/L鹽酸硫胺素、0.5mg/L煙酸和0.1mg/L鹽酸吡哆醇組成；

所述1/2MS培養基由950mg/L硝酸鉀、166.1mg/L氯化鈣、825mg/L硝酸銨、90.35mg/L硫酸鎂、85mg/L磷酸二氫鉀、0.025mg/L硫酸銅、6.2mg/L硼酸、16.9mg/L硫酸錳、0.25mg/L鉬酸鈉、8.6mg/L硫酸鋅、0.025mg/L氯化鈷、0.83mg/L碘化鉀、27.8mg/LFeSO₄·7H2O、37.26mg/LNa2-EDTA·2H₂O、2.0mg/L甘氨酸、100mg/L肌醇、0.50mg/L煙酸、0.1mg/L鹽酸硫胺素和0.5mg/L鹽酸吡哆醇組成。

2.如權利要求1所述的培養基組合，其特征在于，所述藍莓的品種選自JE、公爵、藍豐、甜心。

3.如權利要求1所述的培養基組合，其特征在于，在所述愈傷誘導培養基中，CPPU的濃度為2.0mg/L，2-ip的濃度為0.2mg/L。

4.如權利要求1所述的培養基組合，其特征在于，在所述生芽培養基中，CPPU的濃度為1.0mg/L，2-ip的濃度為0.4mg/L。

5.如權利要求1所述的培養基組合，其特征在于，在所述生根培養基中，NAA的濃度為2.0mg/L。

6.如權利要求1所述的培養基組合，其特征在于，所述培養基組合還包括繼代培養基；

所述繼代培養基由WPM培養基、4-8g/L瓊脂、20-30g/L蔗糖、0.5-3.0mg/L CPPU組成，所述繼代培養基的pH為5.0-5.5。

7.如權利要求6所述的培養基組合，其特征在于，在所述繼代培養基中，CPPU的濃度為3.0mg/L。

8.一種藍莓組織擴繁方法，所述組織擴繁方法為：將藍莓外植體接種到權利要求1-5中任一項所述的培養基組合中的所述愈傷誘導培養基中進行誘導培養，形成藍莓愈傷組織；

將所述藍莓愈傷組織的愈傷團接種到權利要求1-5中任一項所述的培養基組合中的所述生芽培養基中進行生芽培養，形成長有不定芽的藍莓植株；

將所述長有不定芽的藍莓植株接種到權利要求1-5中任一項所述的培養基組合中的所述生根培養基中進行生根培養，形成長有不定芽和根的藍莓植株。

9.如權利要求8所述的組織擴繁方法，其特征在于，所述誘導培養為暗培養。

10.如權利要求8所述的組織擴繁方法，其特征在于，所述誘導培養中，溫度為22-26℃。

11.如權利要求8所述的組織擴繁方法，其特征在于，所述誘導培養中，時間為12-22天。