[發(fā)明專利]PRMT3在診斷或治療復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110414167.2
• 申請日: 2021-04-16
• 公開（公告）號: CN113106154B
• 公開（公告）日: 2022-10-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 金莉萍;徐向紅;郝璠;唐林晨
• 申請（專利權(quán)）人: 上海市第一婦嬰保健院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;G01N33/573;A61K45/00;A61P15/06;A01K67/02
• 代理公司: 上海卓陽知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 31262
• 代理人: 周春洪

本發(fā)明涉及PRMT3在診斷或治療自然流產(chǎn)中的應(yīng)用。本發(fā)明通過分析比較正常妊娠和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(RSA)患者蛻膜中PRMT3的表達水平，發(fā)現(xiàn)RSA患者蛻膜組織及蛻膜巨噬細胞中存在PRMT3表達水平升高的現(xiàn)象；體外抑制PRMT3可降低滋養(yǎng)細胞HTR?8/SVneo的凋亡；體內(nèi)動物試驗顯示，PRMT3抑制劑可降低CBA/J×DBA/2自然流產(chǎn)小鼠模型的胚胎吸收率，從而為臨床上自然流產(chǎn)的診斷和治療提供了新方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及疾病診斷和治療領(lǐng)域，具體地說，涉及PRMT3在診斷或治療復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)(RSA)是一個重要的全球性健康問題，對受影響的夫婦而言，其心理和經(jīng)濟負擔(dān)并未得到充分重視。RSA與父母染色體異常，血栓性疾病以及結(jié)構(gòu)性子宮異常相關(guān)，但是有50％的RSA病因不明，因此闡明RSA的發(fā)生機制以及提供相應(yīng)的防治策略具有重要的理論和臨床意義。妊娠是一個復(fù)雜的生理過程，在妊娠初期，胎兒滋養(yǎng)細胞侵入子宮粘膜并重塑子宮血管。子宮內(nèi)膜通過蛻膜化過程變成蛻膜，以維持胚胎生長發(fā)育。滋養(yǎng)細胞、蛻膜免疫細胞和蛻膜基質(zhì)細胞是母胎界面主要的細胞群體，彼此之間的相互對話對成功妊娠至關(guān)重要。在母胎界面的免疫細胞中，巨噬細胞約占蛻膜白細胞總數(shù)的20％，是僅次于子宮NK細胞的第二大白細胞種群，并且在整個妊娠過程中，蛻膜巨噬細胞的數(shù)量保持穩(wěn)定。盡管胚胎植入是一個炎癥過程，但成功的妊娠取決于胚胎植入引起的炎癥反應(yīng)是否及時消失，并在母胎界面轉(zhuǎn)換為免疫耐受的微環(huán)境。越來越多的研究顯示：蛻膜巨噬細胞在妊娠早期發(fā)揮抗炎吞噬作用，并參與調(diào)節(jié)母胎界面免疫微環(huán)境、胎盤血管重塑、胚胎植入以及維持妊娠等生理過程。因此，探討蛻膜巨噬細胞可能的致病因素能為復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的臨床診斷和治療提供一些新思路和新方法。

一氧化氮(Nitric oxide，NO)是一種重要的細胞信使分子和效應(yīng)分子。它在多種生理和病理過程中發(fā)揮重要調(diào)控作用。NO主要由一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase，NOS)催化L-精氨酸所產(chǎn)生。不對稱二甲基精氨酸(Asymmetric dimethylarginine，ADMA)是一種非特異性內(nèi)源性NOS抑制劑。它由蛋白精氨酸殘基經(jīng)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(Argininemethyltransferase，PRMT)甲基化產(chǎn)生，PRMTs的甲基化是一個重要的翻譯后修飾。它調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄、DNA修復(fù)、信使RNA的加工，和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等多種生理過程。至今已在哺乳動物細胞中發(fā)現(xiàn)9種PRMTs。PRMT3包含一個C2H2鋅指結(jié)構(gòu)域，該結(jié)構(gòu)域在其他PRMT中不存在，并且該結(jié)構(gòu)域?qū)τ诘孜镒R別至關(guān)重要。PRMT3主要是胞質(zhì)蛋白。兩個先前的研究表明，PRMT3在體外通過鋅指結(jié)構(gòu)域與rpS2相互作用使得rpS2甲基化。PRMT3基因敲除小鼠的后代生育力并未受到影響。也有文獻報道，PRMT3敲除的新生小鼠發(fā)育遲緩。由于確定的底物有限，目前對于PRMT3功能的研究還非常有限。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供PRMT3的新用途。

第一方面，本發(fā)明提供了PRMT3作為診斷標志物在制備復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，所述診斷試劑或試劑盒用于檢測蛻膜組織或蛻膜巨噬細胞中PRMT3基因或蛋白的表達水平。

第二方面，本發(fā)明提供了檢測PRMT3基因或蛋白表達水平的試劑在制備復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的診斷試劑或試劑盒中的應(yīng)用。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，所述診斷試劑或試劑盒用于檢測蛻膜組織或蛻膜巨噬細胞中PRMT3基因或蛋白的表達水平。

第三方面，本發(fā)明提供了PRMT3基因或蛋白的抑制劑在制備治療復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的藥物中的應(yīng)用。

作為本發(fā)明的一種優(yōu)選實施方式，所述抑制劑為化合物小分子或生物大分子。

第四方面，本發(fā)明提供了一種復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)動物模型的建立方法，包括給予動物物質(zhì)以降低動物蛻膜組織或蛻膜巨噬細胞中PRMT3基因或蛋白的表達水平的步驟。