[發明專利]酵母細胞壁納米顆粒及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202110409842.2
• 申請日: 2021-04-16
• 公開（公告）號: CN113143977B
• 公開（公告）日: 2022-04-05
• 發明（設計）人: 汪超;徐嘉潞
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C12N1/06
• 分類號: C12N1/06;A61K36/064;A61K9/14;A61P35/00;B82Y5/00;B82Y40/00;C12N13/00
• 代理公司: 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257
• 代理人: 王玉仙

1.一種酵母細胞壁納米顆粒，其特征在于，所述的酵母細胞壁納米顆粒是通過去除酵母的內含物，將收集的酵母細胞壁采用超聲破碎和差速離心的方式獲得，所述的酵母細胞壁納米顆粒的粒徑為10-100nm，所述的酵母細胞壁納米顆粒的電位為-1mV～-50mV；

所述的酵母細胞壁納米顆粒的制備方法，包括如下步驟：

S1、將酵母細胞進行破壁處理，收集細胞壁組分；所述的破壁處理是采用將酵母細胞懸浮于堿液中，在70～90℃加熱0.5～2小時；所述的堿液為0.8～1.5M NaOH溶液；收集細胞壁組分是采用2000g離心力離心10分鐘；

S2、將S1步驟收集的細胞壁組分進行清洗，干燥后得到細胞壁粉末；

S3、將S2步驟的細胞壁粉末重懸于緩沖液中，進行超聲破碎，破碎后采用600～1200g轉速離心，收集上清液；超聲破碎的條件是：在80～120W超聲功率下，按照超聲2～4秒、間隙6～8秒的頻率，超聲處理80～120次；

S4、將S3步驟的上清液采用2000～3000g轉速離心，收集上清液；

S5、將S4步驟的上清液采用8000～11000g轉速離心，收集上清液；

S6、將S5步驟的上清液采用18000～22000g轉速離心，收集沉淀；

其中，S6步驟收集的沉淀為所述的酵母細胞壁納米顆粒；

S2步驟中，清洗包括如下步驟：

S01、將S1步驟收集的細胞壁組分采用pH為4-5的稀鹽酸，50～60℃加熱0.5～2小時，采用1500～2500g離心力離心，收集沉淀；

S02、將S01步驟收集的沉淀依次采用超純水、異丙醇、丙酮進行洗滌。

2.一種權利要求1所述的酵母細胞壁納米顆粒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、將酵母細胞進行破壁處理，收集細胞壁組分；所述的破壁處理是采用將酵母細胞懸浮于堿液中，在70～90℃加熱0.5～2小時；所述的堿液為0.8～1.5M NaOH溶液；收集細胞壁組分是采用2000g離心力離心10分鐘；

S2、將S1步驟收集的細胞壁組分進行清洗，干燥后得到細胞壁粉末；

S3、將S2步驟的細胞壁粉末重懸于緩沖液中，進行超聲破碎，破碎后采用600～1200g轉速離心，收集上清液；超聲破碎的條件是在80～120W超聲功率下，按照超聲2～4秒、間隙6～8秒的頻率，超聲處理80～120次；

S4、將S3步驟的上清液采用2000～3000g轉速離心，收集上清液；

S5、將S4步驟的上清液采用8000～11000g轉速離心，收集上清液；

S6、將S5步驟的上清液采用18000～22000g轉速離心，收集沉淀；

其中，S6步驟收集的沉淀為所述的酵母細胞壁納米顆粒；

S2步驟中，清洗包括如下步驟：

S01、將S1步驟收集的細胞壁組分采用pH為4-5的稀鹽酸，50～60℃加熱0.5～2小時，采用1500～2500g離心力離心，收集沉淀；

S02、將S01步驟收集的沉淀依次采用超純水、異丙醇、丙酮進行洗滌。

3.權利要求1所述的酵母細胞壁納米顆粒在制備抗腫瘤免疫藥物中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述的抗腫瘤免疫藥物中包括免疫檢查點抑制劑。