[發明專利]液相色譜中雙重梯度系統及其配套的洗脫程序設置方法

有效

• 申請號: 202110407632.X
• 申請日: 2021-04-15
• 公開（公告）號: CN113109476B
• 公開（公告）日: 2023-10-13
• 發明（設計）人: 鄭云重;鐘啟升;申玲玲;鄺江濛;劉佳琪;黃濤宏
• 申請（專利權）人: 島津企業管理(中國)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/60
• 代理公司: 廣州駿思知識產權代理有限公司 44425
• 代理人: 吳靜芝

本發明涉及一種液相色譜中雙重梯度系統及其配套的洗脫程序設置方法，該系統包括依序連接的液相組合泵、混合器、進樣裝置、分離柱和檢測器；所述液相組合泵可向所述混合器獨立抽送至少三種溶劑作為流動相，所述三種溶劑分別為弱溶劑、強溶劑A和強溶劑B，所述弱溶劑、強溶劑A和強溶劑B對于分離目標物的洗脫能力依序增強；所述液相組合泵通過調節所抽送溶劑之間的比例，形成流動相的第一洗脫梯度和第二洗脫梯度，所述第一洗脫梯度為所述弱溶劑與所述強溶劑A和強溶劑B之和的比例，所述第二洗脫梯度為所述強溶劑A與強溶劑B的比例。本發明的系統和洗脫程序設置能提高分離柱中寬極性化合物的分離能力，還能把分離柱中超低極性化合物清洗出來。

技術領域

本發明涉及儀器分析領域，特別是涉及一種液相色譜中雙重梯度系統及其配套的洗脫程序設置方法。

背景技術

反相液相色譜適用于中低極性化合物的分離。在分離過程中，化合物受色譜柱鍵合相的結合力和流動相洗脫力的雙重作用。當整個分離過程中，如果化合物的極性較適中，流動相對其的洗脫力強于它與鍵合相的結合力時，目標物將會被流動相逐漸向前推動，最終被流動相沖洗出色譜柱而出峰。

但是，如果化合物極性非常低(即強保留化合物)，則其與反相鍵合相的結合力將非常強，普通的反相流動相，如乙腈和甲醇的洗脫能力不足以將這些化合物從鍵合相中洗脫出來，最終表現則是這些超低極性化合物不出峰。實際樣品中所涵蓋的化合物極性范圍一般較廣，特別是用液液萃取法提取的溶解在非極性溶劑里的樣品。色譜柱用久了柱效下降的其中一個原因就是這些超低極性化合物與鍵合相牢牢結合無法被洗脫置換，相當于有效鍵合位點慢慢變少，柱效肯定就下降了。

發明內容

基于此，為了提高分離柱中寬極性化合物的分離能力，也為了能把分離柱中超低極性化合物清洗出來，本發明提供了一種液相色譜中雙重梯度系統及其配套的洗脫程序設置方法。

本發明采取的技術方案如下：

一種液相色譜中雙重梯度系統，其特征在于：包括依序連接的液相組合泵、混合器、進樣裝置、分離柱和檢測器；所述液相組合泵可向所述混合器抽送至少三種溶劑作為流動相，所述三種溶劑分別為弱溶劑、強溶劑A和強溶劑B，所述弱溶劑、強溶劑A和強溶劑B對于分離目標物的洗脫能力依序增強；所述液相組合泵通過調節所抽送溶劑之間的比例，形成流動相的第一洗脫梯度和第二洗脫梯度，所述第一洗脫梯度為所述弱溶劑與所述強溶劑A和強溶劑B之和的比例，所述第二洗脫梯度為所述強溶劑A與強溶劑B的比例。

在分析分離過程中，所述液相組合泵抽送的各種溶劑通過混合器進行溶劑混合，再進入進樣裝置引入樣品，然后推送樣品進入分離柱進行分離，最后從分離柱中洗脫流出進入檢測器得到信號。

本發明的雙重梯度系統，利用液相組合泵獨立抽送洗脫能力不同的弱溶劑、強溶劑A和強溶劑B(超強洗脫能力的溶劑)，從而在分析分離過程中可以設置雙重洗脫梯度，第一洗脫梯度為弱溶劑與強溶劑A+B，第二洗脫梯度為強溶劑A與強溶劑B。

由此，采用本發明的雙重梯度系統，配合特定的洗脫程序設置，包括每個溶劑的流速、比例變化及對應時間節點等，能夠實現一次進樣分析從弱極性到超強極性目標物質的洗脫分離，整個分析過程可以自動化控制，有效對寬極性跨度目標物進行分析檢測。

具體來說，在分析初始階段，先以弱洗脫能力的弱溶劑為主體，強洗脫能力的強溶劑A或A+B占少數比例，把樣品中的弱保留化合物洗脫出來，再逐漸提高強溶劑的比例，并慢慢把強洗脫能力的強溶劑A置換成超強洗脫能力的強溶劑B，最終變成了超強洗脫溶劑占絕對大比例，提高了整體流動相的洗脫能力，并把超強保留的化合物洗脫出來。

進一步地，所述液相組合泵為內置梯度比例閥的單個泵；或者，所述液相組合泵由兩個泵組成，其中一個泵內置有梯度比例閥；或者，所述液相組合泵由三個泵組成。

進一步地，所述進樣裝置為自動進樣器或定量環。