[發明專利]用于N末端腦利鈉肽前體檢測的組合物和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法

在審

• 申請號: 202110407489.4
• 申請日: 2021-04-15
• 公開（公告）號: CN113125760A
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 秦軍;謝元東;謝良思;賀琪琪;王曉寧
• 申請（專利權）人: 江蘇優尼泰克生物科技有限公司;北京聯眾泰克科技有限公司
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/532;G01N33/543
• 代理公司: 北京思創大成知識產權代理有限公司 11614
• 代理人: 高爽

本發明涉及電化學檢測領域，特別涉及N末端腦利鈉肽前體(NT?proBNP)檢測的組合物及應用和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法。本發明采用方法為電化學發光法，采用吡啶釕作為化學發光標記物具有明顯優勢，主要表現在：靈敏度更好，穩定性更好，釕是金屬離子，分子量小，不影響抗體的空間位阻。生產過程短，重復性好，檢測范圍寬。電化學發光反應可控，降低信號采集難度。

技術領域

本發明涉及電化學檢測領域，特別涉及用于N末端腦利鈉肽前體(NT-proBNP)檢測的組合物，該組合物的應用，包含該組合物的磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒，以及基于該組合物或試劑盒的磁微球電化學發光免疫檢測方法。

背景技術

ProBNP主要由心室分泌，可用于診斷和對預后的預測，是最有力的能獨立預測急性冠脈綜合征患者在一年內死亡率的預測物。血清和血漿中NT-proBNP的濃度與左室功能不全的預后有關。

左室功能不全通常伴隨冠心病、動脈高壓、心瓣膜病和原發性心肌病而發生。如果左室功能不全未得到及時治療而使其進一步發展，患者的死亡率增高。其NT-proBNP水平隨著級數的增加而升高，反映了心臟損害的嚴重程度。NT-proBNP的高靈敏度也使其可以監測罹患器質性心臟病無癥狀患者的輕度心臟功能障礙。過去常用臨床信息與成像的方法診斷左室功能不全，已經證明利鈉肽在控制心血管系統功能中的意義。

另外，NT-proBNP適用于血管重建的評價，因此有助于個體恢復步驟的建立。NT-proBNP還可反映心臟功能，并表明準備采用心臟毒性藥物或導致液體潴留或體積過載(如COX-2抑制劑、非類固醇消炎藥)的干預措施的病人風險增加。

到目前為止，用于檢測人血清中NT-proBNP的方法主要有：酶聯免疫法(ELISA)和酶促磁微粒化學發光。本發明采用方法為電化學發光法，采用三聯吡啶釕作為化學發光標記物具有明顯優勢，主要表現在：靈敏度更好，穩定性更好，三聯吡啶釕是金屬離子，分子量小，不影響抗體的空間位阻。生產過程短，檢測范圍寬，重復性好。電化學發光反應可控，降低信號采集難度。

發明內容

本發明提供了一種用于N末端腦利鈉肽前體(NT-proBNP)檢測的組合物及應用和磁微球電化學發光免疫檢測試劑盒與檢測方法，具有生產效率高、檢測時間短、適用于全自動檢測，具有更高的靈敏度、線性范圍寬等優點。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了用于N末端腦利鈉肽前體(NT-proBNP)檢測的組合物，包括NT-proBNP試劑Ra、NT-proBNP試劑Rb、鏈霉親和素超順磁微球；

所述NT-proBNP試劑Ra包括含生物素標記的抗NT-proBNP單克隆抗體；

所述NT-proBNP試劑Rb包括含三聯吡啶釕標記的抗NT-proBNP單克隆抗體；

所述鏈霉親和素超順磁微球包括表面包裹帶有鏈霉親和素的超順磁微球。

在本發明的一些具體實施方案中，所述超順磁微球的粒徑在1.5～5.0μm。

在本發明的一些具體實施方案中，所述NT-proBNP試劑Ra中，每個抗體分子表面的生物素分子標記量為2～5個；所述NT-proBNP試劑Rb中，每個抗體分子表面的釕分子標記量為2～10個。

在本發明的一些具體實施方案中，所述NT-proBNP試劑Ra的制備方法為：在緩沖液存在的條件下，取抗NT-proBNP單克隆抗體與生物素混合，制得所述NT-proBNP試劑Ra；所述緩沖液包括pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的磷酸鹽緩沖液或pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的三羥甲基氨基甲烷緩沖液。